[发明专利]一种西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法在审
申请号: | 201710959420.6 | 申请日: | 2017-10-16 |
公开(公告)号: | CN107494278A | 公开(公告)日: | 2017-12-22 |
发明(设计)人: | 李操 | 申请(专利权)人: | 李操 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙)44295 | 代理人: | 蔡国,马赟斋 |
地址: | 546899 广西壮族自*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 西贡 脱毒 组培苗 方法 | ||
1.一种西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)选取长势旺盛的无病西贡蕉母株,摘取所述母株的吸芽作为后续繁殖用的外植体;
(2)所述吸芽洗净后,去外层苞片及切除基部部分组织,保留具有顶芽和侧芽原基的小干茎,之后置于恒温培养箱中在37-41℃下高温钝化,钝化完成后进行灭菌处理;
(3)将经过步骤(2)处理的吸芽切块,每块具有1-2个芽原基,之后分别接种于初代培养基中,进行初代培养;
(4)待长出丛生苗后切取茎尖,将茎尖接种至初代培养基中进行初代培养;
(5)待所述茎尖长出丛生芽后,转入继代培养基中进行继代培养;
(6)待所述丛生芽长大成苗株且株高达6-7cm时,转入诱导生根培养基中进行诱导生根,获得组培苗;
(7)所述组培苗移至室外进行炼苗,之后假植后移植至室外环境下种植。
2.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(1)中采用的吸芽在母株采收果穗后,球茎上距其残芽一定距离处长出的吸芽,且应当选择在早春与秋季干旱季节采芽。
3.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(2)中,所述高温钝化时间为5-6h。
4.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(2)中,所述吸芽经自来水冲洗干净,再用洗衣粉洗2-3次后再剥去外层苞片及切去基部部分组织;所述灭菌处理则是先经紫外光灭菌30-40分钟后,再用0.1-0.4%氯化汞溶液浸泡15-20分钟,期间常翻动,之后用无菌水反复洗3-4次后用于接种。
5.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(3)中,吸芽块不能倒放,其基部切口应插入初代培养基内;所述的初代培养基在MS培养基的基础上含有以下成分:
3.0-4.5mg/L6-BA+5.0-10.0mg/LAD+3.0-4.0%蔗糖+0.57-0.6%琼脂,pH5.5-5.8。
6.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(3)中,温度控制在25-28℃,培养早期可不照光,待萌动后每天光照10-12小时,光照2200-2800Lux,相对湿度70-85%。
7.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(4)中是自吸芽培养40-60天后所得的丛生苗中选取粗壮的已形成基盘的长约3-5cm的无根苗进行取茎尖;具体取茎尖操作为:用无菌水中洗涤干净,再用无菌吸水纸将表面水分吸干,在超净工作台上操作,用镊子将小叶片剥除,直至生长点充分暴露,然后用锐利的解剖刀切取大小0.5-1.5mm的带有1-2个叶原基的茎尖,经无菌水洗净后,接种至初代培养基上,接种时注意勿倒置或斜放。
8.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(5)自第一次继代培养起每25-30天继代一次,一般继代培养不宜超过8代,以防发生变异,所述的西贡蕉继代培养基在MS培养基的基础上含有以下成分:
2.0-3.5mg/L 6-BA+2.5-8.5mg/LAD+0.1-0.5mg/LNAA+3.0-4.0%蔗糖+0.57-0.6%琼脂,pH5.5-5.8。
9.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(6)中的诱导生根培养基在1/2MS的基础上还含有以下成分:
0.2-0.8mg/L IBA+0.5-1.0g/L活性炭+3.0-4.0%蔗糖+0.57-0.6%琼脂,pH5.5-5.8。
10.根据权利要求1所述的西贡蕉脱毒组培苗的快繁方法,其特征是,所述步骤(7)中具体操作为:
a.移载炼苗:将装有组培苗的培养基容器置阳光下晒苗2-3天,晒苗只能在上午9-11时阳光不太强时进行,然后打开瓶盖,如法晒苗2-3天;
b.组培苗根部沾着的培养基被冲洗干净后,晾干水分,再假植于营养杯中,并淋透水,得到假植苗;
c.假植苗及管理:将假植苗放在能保湿、冬季能保温又能防虫的大棚内,种植中注意保水保肥。
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