[发明专利]一种嗜热链球菌增菌培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于益生菌培养技术领域，具体涉及一种嗜热链球菌增菌培养基及其制备方法。

背景技术

嗜热链球菌培养基的种类繁多，目前最常见的有四种：MRS培养基、乳清蛋白培养基、脱脂乳培养基、脱脂乳酶解液培养基。MRS培养基适用范围广，几乎所有乳酸菌都可以用其来培养，但增殖速度慢，价格高。乳清蛋白培养基，简单易得，被广泛使用，但由于其乳清蛋白易发生变性沉淀导致用此培养基所培养的菌存活率较低。脱脂乳培养基，同乳清蛋白培养基一样简单易得，价格低廉，但培养基粘度较大，不易操作。脱脂乳酶解液培养基，是有利于嗜热链球菌繁殖的较好的基础培养基，通过使用酶来分解大分子营养物，将不易吸收利用的大分子物质转化为易被吸收利用的小分子物质，从而有利于菌体的增殖，但培养基价格较高，不利于工业生产，工业生产中应用的培养基，一般要求配料简单易得、操作方便、菌体存活率高、增殖速度快、而且培养基与菌体易于分离。

嗜热链球菌增菌培养基使用天然物质来代替化学原料，优化嗜热链球菌培养基，改善培养效果。这些天然物质主要有多糖类、低聚糖类、蛋白质类物质、天然水果蔬菜及豆类、坚果类等。嗜热链球菌增菌培养基材料简单易得，成本低，操作方便，大大提高了菌的存活率，缩短培养时间，有利于工业生产。

苹果富含糖类、酸类、芳香醇类和果胶等物质。王皎、李赫宇、岱琳等对苹果的不同组织研究发现，苹果中的糖类物质大量存在于苹果果肉中，主要包括单糖及双糖。梁俊、郭燕、刘玉莲等对12种品种的苹果进行试验研究，得出结论：苹果中果糖含量最多，其次是葡萄糖，最后是蔗糖。在培养基中加入苹果能为菌的增殖提供丰富的葡萄糖、果糖、蔗糖等碳水化合物。孙文静在研究中表明：苹果中含有丰富的营养物质，适合乳酸菌的生长，而且乳酸菌也是苹果渣培养基中的优势菌。张彪燕表示：苹果中含有丰富的可溶性糖类，蛋白含量较少，适合充当培养基碳源。培养基中加入含量为10%的鲜苹果汁，并于28℃下培养1～2d，可使嗜热链球菌等益生菌的数量大大提高，最大活菌数达到了5.6×10⁷CFU/mL。侯蓓将苹果进行处理后加入嗜热链球菌培养基，在39℃下培养30h，最大活菌数为4.8×10⁹CFU/mL。

香蕉的糖类主要是低聚果糖，而且当香蕉达到最高成熟度时，其低聚糖含量最多。王晓晴，王榆元，周春宏等人研究中发现：添加低聚果糖可以促进嗜热链球菌的生长。候聚敏在研究中得出结论：培养基中加入2%低聚果糖作为碳源，嗜热链球菌的活菌数可达1.5×10¹⁰CFU/mL。

红糖和白糖都是从甘蔗中提取出来的，但两者制作工艺不同，其成分也就不同。张兴昌在研究中表明：蔗糖作为双糖有利于嗜热链球菌的增殖。同时，蒲博通过研究得出结论：用2.0%的蔗糖作为MRS固体培养基的碳源可使植物乳杆菌的菌落数增加3.91倍。

鲜玉米中含有丰富的可溶性蛋白质、氨基酸、淀粉、维生素和矿物质等，其营养结构很适合嗜热链球菌吸收利用。朱克卫在研究中使用玉米作为氮源，结果表明：40g/L的玉米浆为最佳浓度，在此条件下，菌体繁殖最快，产物最多，效果最佳。田洪涛、贾英民、马雯等人表明玉米中丰富的氨基酸、生物素等物质，因而非常适合嗜热链球菌的生长繁殖，经过试验结果分析得出：在培养基中加入0.5%的玉米浆能促进嗜热链球菌生长，其活菌数达到4.7×10⁹CFU/mL。

黄豆中蛋白含量约38%以上，氨基酸成分组成合理，必需氨基酸含量丰富，是植源性全蛋白，在营养价值上跟动物性蛋白可相媲美，属于优质蛋白。李莹、周剑忠、黄开红通过对不同氮源对嗜热链球菌繁殖的影响进行了比较：培养基中加入2%的豆浆，在37℃下培养30h，嗜热链球菌的活菌数达到了3.9×10¹⁰CFU/mL，相对于MRS培养基增菌效果大大提高。胡渊、刘成国、黄茜等人也发现黄豆浆具有良好的增菌效果。

平菇属于蔬菜类中的高蛋白食物，富含粗蛋白，营养价值丰富。刘丹、潘道东在研究中使用质量分数为10%的平菇汁为氮源，使乳酸菌数显著提高。

红豆属于豆类一种，含有丰富的蛋白质、淀粉、维生素和矿物质，具有营养价值，而且具有丰富的赖氨酸。袁肖寒、高学军在实验中表示：对嗜热链球菌增殖效果最明显的氨基酸为谷氨酸、赖氨酸等。

陈功、徐文华、张其圣等人通过研究得出结论：在普通培养基的基础上添加尖椒汁，能提高活菌的数量。

闫亚梅等人研究发现：在培养基中加入黄瓜汁能大大提高乳酸菌数量，活菌数达到10⁹CFU/mL以上。