[发明专利]聚乙二醇修饰氧化石墨烯载槲皮素交联脱细胞真皮基质的3D药物复合支架的制作方法

说明书

本发明公开了一种聚乙二醇修饰氧化石墨烯载槲皮素交联脱细胞真皮基质的3D药物复合支架的制作方法，步骤如下：首先，取ICR小鼠全皮制成圆形脱细胞真皮基质(ADM)支架；其次，氧化石墨烯(GO)在EDC催化下，将6臂氨基聚乙二醇(PEG)接枝到GO上制成聚乙二醇修饰的氧化石墨烯(GO‑PEG)；然后，将槲皮素(Que)吸附到GO‑PEG上，制得的GO‑PEG/Que交联到ADM支架表面；最后，制得一种聚乙二醇修饰氧化石墨烯载槲皮素交联脱细胞真皮基质(ADM‑GO‑PEG/Que)的3D药物复合支架，将该复合支架移植到糖尿病皮肤伤口可达到传递药物及修复伤口愈合的效果。

技术领域

本发明涉及皮肤移植技术领域，具体涉及一种聚乙二醇修饰氧化石墨烯载槲皮素交联脱细胞真皮基质的3D药物复合支架的制作方法。

背景技术

聚乙二醇修饰的氧化石墨烯(GO-PEG)，具有高度的稳定性和优异的生物相容性，作为一种新型的载体，近几年在科学界已经吸引了越来越多的关注。GO-PEG首次报道于2008年，Dai Hongjie课题组将石墨氧化，然后在强碱条件下将氧化石墨烯(GO)的羧基活化，再将具有6臂氨基的聚乙二醇(PEG)在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)催化下接枝到GO上，获得了一种尺寸小于50nm的2D纳米载体。GO-PEG具有超高的药物吸附能力，可以通过π-π堆垛将喜树碱衍生物(SN38)、阿霉素(DOX)等抗癌药物吸附在GO-PEG表面。GO-PEG在生理盐水和血清中能稳定存在，并具有良好的水溶性可用于难溶性药物的增溶，同时，形成的形成GO-PEG/药物复合物具有良好的生物相容性，通过胞吞作用进入细胞在溶酶体中释放药物，释放的GO-PEG载体没有明显的细胞毒性，通过胞吐机制排到细胞外。因此，GO-PEG可作为理想的药物载体用于临床医学。

槲皮素(Que)，一种天然的黄酮类化合物，毒副作用小，在许多不同的领域引起了广泛的关注，包括其抗氧化活性、抗病毒活性、抗癌活性、抗糖尿病并发症、抗炎、抗溃疡、降血压和降血脂等作用。近年的研究还发现槲皮素可诱导干细胞分化为成脂细胞和成骨细胞，为干细胞组织工程提供了理论基础。然而，槲皮素几乎不溶于水和低生物利用度极大限制了其临床应用。常见的槲皮素给药方式如纳米脂质载体法，但其载药能力有限，药物突释、药物储存泄露等现象普遍存在。为了克服这一难题，必须开发一种物理和化学双向调控的，更高效的的给药系统。

脱细胞真皮基质(ADM)是用物理、化学等方法将动物或人类皮肤去除全部的表皮层和真皮层的细胞后获得的含胶原成分的细胞外基质网状薄片，广泛应用于临床治疗如面部美容、整形外科、口腔、耳鼻喉科及尿道修复等等。ADM具有很多优点：首先，ADM去除了细胞成分，失去了Ⅰ、Ⅱ型细胞相容性抗原的主要免疫活性，保留的主要成分有胶原、弹性原、蛋白多糖及糖胺多糖等不溶性基质，因此无明显免疫原性。其次，ADM保留有天然的3D胶原纤维网络结构和真皮中含胶原支架的细胞外基质能发挥真皮模板的作用，为组织细胞附着、再生提供一个良好的支架结构。此外，ADM植入损伤机体可以与外界形成物理屏障，减少伤口收缩，引导成纤维细胞和胶原生长，有效预防疤痕的形成，防止局部组织粘连以及病理性增生。最后，ADM具有一定的组织特异性，特定器官来源的胞外基质能成功应用于其对应的器官，组织引导器官的再生。研究发现，ADM移植糖尿病皮肤创面不仅能够为细胞增殖、迁移及吸附提供良好的生长代谢立体框架，亦可作为组织工程新型载体材料。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中的上述缺陷，提供一种聚乙二醇修饰氧化石墨烯载槲皮素交联脱细胞真皮基质的3D药物复合支架的制作方法

本发明的目的可以通过采取如下技术方案达到：

一种聚乙二醇修饰氧化石墨烯载槲皮素交联脱细胞真皮基质的3D药物复合支架的制作方法，所述的制作方法包括下列步骤：

S1、取ICR小鼠全皮制成一定直径的圆形脱细胞真皮基质支架；