[发明专利]一种采用重量法测定人参总皂苷的方法有效
申请号: | 201710969991.8 | 申请日: | 2017-10-18 |
公开(公告)号: | CN107687987B | 公开(公告)日: | 2020-08-11 |
发明(设计)人: | 逄世峰;王英平;王佳;肖盛元 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院特产研究所 |
主分类号: | G01N5/04 | 分类号: | G01N5/04 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 赵丽娜 |
地址: | 130112 吉林省长*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 采用 重量 测定 人参 皂苷 方法 | ||
1.一种采用重量法测定人参总皂苷的方法,其特征在于,主要包括如下步骤:
(A)将人参根茎烘干、粉碎,采用甲醇-氨水的混合水溶液处理回流提取得到提取液;
(B)将提取液蒸发溶剂干燥后的残渣进行纯化,计算总皂苷的质量百分比含量,即可;
所述步骤(A)中,甲醇-氨水的混合水溶液中氨水的体积百分比含量为3-5%之间;
所述步骤(B)中,纯化的步骤包括:将干燥后的残渣用二氯甲烷萃取,静置至分界面清晰,弃去下层二氯甲烷,收集水层至蒸发皿中,水浴蒸干,加水洗涤残渣,合并洗涤液离心,上清液加入已处理的固相萃取小柱,当样品全部流过固相萃取小柱,去掉注射器针头,用200-400mL水洗脱样品中水溶性杂质,换100-200mL的甲醇洗脱,即可;
所述固相萃取小柱的制备方法包括:将玻璃柱或塑料柱的底部加一层筛板,然后倒入8-12ml的反相聚合物,在上层再加一层筛板,用50-100ml甲醇冲洗固相萃取柱,即可;
所述固相萃取小柱使用前先采用200-300ml的水将甲醇替换;
所述反相聚合物为NM200反相聚合物。
2.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,粉碎的目粒度控制在60目以上;烘干的温度为40-55℃。
3.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,粉碎的目粒度控制为70-100目;烘干的温度为45℃。
4.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,甲醇-氨水的混合水溶液处理的步骤包括:将粉碎的人参根茎放于滤纸筒中置于索氏提取器中,添加所述甲醇-氨水的混合水溶液。
5.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,甲醇-氨水的混合水溶液中氨水的体积百分比含量为4%。
6.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,甲醇-氨水的混合水溶液中甲醇的体积比百分比含量70-90%之间。
7.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,甲醇-氨水的混合水溶液中甲醇的体积比百分比含量为80%。
8.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,提取温度控制在90-100℃之间;提取时间控制在8-12h之间。
9.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,每克的人参根茎添加甲醇-氨水的混合水溶液20-50ml。
10.根据权利要求1所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(A)中,每克的人参根茎添加甲醇-氨水的混合水溶液为30-40ml。
11.根据权利要求9所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(B)中,加水洗涤残渣,合并洗涤液离心10min以上,离心的速率控制在8000rpm以上。
12.根据权利要求11所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(B)中,离心的速率为9000-11000rpm之间。
13.根据权利要求1-11任一项所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(B)中,纯化后进行水浴干燥,干燥的温度在90℃以上。
14.根据权利要求1-11任一项所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(B)中,纯化后进行水浴干燥,干燥的温度为100℃。
15.根据权利要求1-12任一项所述的测定人参总皂苷的方法,其特征在于,所述步骤(B)中,所述总皂苷的质量百分比含量的计算方法包括:将称量皿与进行所述干燥后物质的总质量减去所述称量皿的质量之后,与所述人参根茎的质量两者的质量百分比。
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