[发明专利]一种UPLC/Q-TOF-MS测定党参炔苷含量的方法

说明书

本发明属于中药药代动力学领域，具体涉及一种UPLC/Q‑TOF‑MS测定健脾组方及党参提取物中党参炔苷的含量的方法，包括下列步骤：1)制备健脾组方或党参提取液；2)采用高效液相色谱‑质谱联用仪分离检测党参炔苷；3)以不同浓度党参炔苷与对应的响应峰面积作图，得到党参炔苷的标准曲线，将待测样品峰面积对照标准曲线计算其党参炔苷含量。本发明建立了应用液质联用技术检测中药党参中、健脾组方中党参炔苷含量的方法。该方法快速、灵敏、稳定性好，为党参炔苷的含量测定提供了新的参考方法。

技术领域

本发明属于中药药代动力学领域，具体涉及一种UPLC/Q-TOF-MS测定党参炔苷含量的方法。

背景技术

中药药代动力学(Pharmacokineties，PK)是应用动力学原理，研究中药活性成分、有效部位、单味药和复方的体内吸收(Abosorpton)、分布(Distribution)、代谢(Metabolism)、排泄(Excretion)和毒性(ADME/Tox)的动态变化规律及其体内量-效、时-效关系，并用数学函数加以定量描述的一门新兴学科。它对阐明中药药效物质基础、揭示中药科学内涵,对中药新药创制、剂型改进以及方剂组分配伍机制的研究均发挥着十分重要的作用，现已成为当今中药现代化研究链上一个不可分割的重要组成部分，从而成为我国药代动力学研究的热点。血药浓度法是药代动力学研究的经典方法,是计算药代动力学最常用最准确的测定方法,所以血药浓度准确的测定是中药药代动力学研究至关重要的环节。LC-MS在中药药代学研究方面的应用是很广泛的。

吴晓霞等从黄连解毒汤生物碱类入手,联用(LC-MS/MS)技术建立了测定药根碱、巴马汀、小果碱血药浓度的方法,并成功应用于黄连解毒汤正常大鼠体内这3个成分的药动学研究,为中药复方药动学研究提供了可以借鉴的分析方法。丁建刚等以地西泮为内标,采用HPLC-MS/MS技术，建立了比格犬血浆中丹参酮IIA的测定方法,而且本法的最低定量浓度为1ng/ml,已完全能够满足实验要求,且样品处理和测定过程简便,适合比格犬体内药代动力学研究。LI等建立了一个快速,特异和敏感的UPLC-MS/MS术分析大鼠口服袖皮苷和袖皮素(骨碎补提取物)后的药代动力学参数,结果显示,该方法符合FDA指导下的生物药品的分析标准,袖皮苷及其活性代谢产物袖皮素的药代动力学研究可以为骨碎补的临床应用提供一个合理的参考。陈宁等建立SPE-HPLC-MS测定大鼠血浆中黄芪甲苷含量的方法,并研究了黄芪甲苷在大鼠体内的药代动力学和组织分布。Yujuan Li应用LC-MS/MS定量分析大鼠血浆中白术内酯Ⅰ的含量并对其药物代谢动力学进行了研究。Xiao-hua Liu等应用UPLC-MS同时检测大鼠口服黄芪提取夜后血浆中毛蕊异黄酮葡糖糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ6种成分，对每种成分进行药代动力学研究。Mei-Ling Hou等应用UPLC-MS/MS技术研究了以三黄泻心汤为基础的7种中成药制剂中6种活性成分的含量。并比较了大鼠灌胃中药单体大黄酸，中药大黄，中药复方三黄泻心汤后，大黄酸单体的药物代谢动力学过程。研究表明中药复方及单味中药中的大黄酸的吸收率高于大黄酸单体的吸收率，从而得出在大黄酸的吸收率方面三黄泻心汤复方优于单味中药大黄及单体大黄酸的结论。中药杂质多，被测物浓度或活性极低，可供分析的样品量少,尤其是在连续测定过程中，很难再度获得完全相同的样品，此外工作量很大，因为中药中含有多种化学成分,而且每种化学成分含量低，需要大量的数据处理和分析,这些都给分析带来了一定的困难，也严重限制了其发展,液质联用色谱分离效能高、灵敏度高、选择性高，排除了这些因素的干扰,推动了中药药代学的发展。

葛根芩连汤是用于治疗胃肠道疾病传统复方。Zhang Y等采用液质联用技术建立了一种同时检测葛根素和大豆黄素有效的方法。并应用该方法比较了葛根芩连汤及葛根提取液中葛根素和大豆黄素的药代动力学差异。结果表明与葛根汤相比，葛根芩连汤中的葛根素和大豆黄素的吸收效率更高，且消除速率下降。为揭示葛根芩连汤的配伍规律提供了科学依据。