[发明专利]白花败酱的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，特别涉及一种白花败酱的组培快繁方法。

背景技术

白花败酱(Patrinia villosa Juss)又名苦菜，是一种药食同源、营养价值和经济价值都很高、具有开发利用价值的野生植物资源，是我国的传统中药，始载于《神农本草经》，其根、根状茎及全草均可入药，性味辛、苦、微寒，具清热解毒，利湿排脓，活血化瘀，清心安神之功能。现代医学研究证实败酱属植物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、镇静、通便、保肝利胆、降血糖、降血脂、提高免疫力等药理作用。具有丰富而全面的营养成分，含有白花败酱多糖、17种氨基酸，其中人体必需的氨基酸有8种，约占氨基酸总量的39.06％，维生素C、β-胡萝卜素、维生素B2等多种维生素的含量远高于一般蔬菜和水果，微量元素铁、锰、铜、锌及常见元素钙、镁、钾含量都比较高，作为绿色无公害保健食品越来越为人们所青睐。

白花败酱的育苗可采用分株、扦插或播种繁殖，这些方法的缺点是繁殖慢，生产周期较长且受季节的限制，易将病毒传给下一代。通过组织培养不仅占地面积小、能够快速繁殖种苗，还可以生产脱毒苗，不受季节的限制，生产周期短，繁殖速度快。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种白花败酱的组培快繁方法，以建立一个低廉高效的白花败酱组培快繁技术体系。

本发明解决所述技术问题的方案为：

白花败酱的组培快繁方法，包括如下步骤，

(1)白花败酱愈伤组织的诱导：愈伤组织培养基为MS+6-BA 1.0～1.5mg/L+NAA 0.3～0.5mg/L+白糖30g/L+琼脂6.5～7.5g/L+20g/L玉米汁，pH5.8～6.0。将经过消毒的外植体切块后接种至愈伤组织培养基上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为14h∶10h；

(2)白花败酱芽的诱导增殖与生根：生芽与生根培养基为MS+6-BA 1.5～2.0mg/L+IAA 0.3～0.50mg/L+白糖30g/L+琼脂6.5～7.5g/L+30g/L马铃薯汁，pH5.8～6.0；将愈伤组织切块后接种到生芽与生根培养基中；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为14h∶10h；

(3)白花败酱试管苗的驯化和移栽：将白花败酱生根试管苗从培养室移至塑料大棚放置1～2d后，去瓶盖炼苗2～3d，然后从瓶内取出白花败酱幼苗，根部用0.1％多菌灵处理8s后移栽到盛有腐殖土与珍珠岩(3∶2)的穴盘中，覆膜保湿3～5d，其间每天通风透气2次，每次8～10min，7d后揭除塑料薄膜，然后进行正常的栽培管理。

作为改进，所述的外植体为叶片或根尖。

作为改进，所述的外植体为叶片和根尖的组合。

作为进一步改进，所述叶片和根尖以1∶1的质量比组合。

作为再进一步改进，所述外植体的消毒方法为：将外植体先用清水冲洗，再用蒸馏水洗2次，然后在75％的酒精中消毒30s，再用无菌水冲洗4次，0.1％HgCl₂消毒8min，最后用无菌水冲洗6次，之后用无菌滤纸吸干材料表面水分。

本发明通过优化组培体系中培养基的成分、激素种类及用量，改变光照时间，提高了白花败酱的繁殖系数，降低了成本；同时简化培养环节，缩短培养周期，起建立一个低廉高效的白花败酱组培快繁技术体系。本发明的另一创新之处在于：发明人在试验中，发现采用将白花败酱的叶片和根尖组合、同时作为外植体，愈伤组织的出愈率达到99.6％以上，高于单独用叶片或单独用根尖作为外植体的出愈率。

具体实施方式

实施例1

白花败酱的组培快繁方法，包括如下步骤，