[发明专利]一种从北葶苈子中提取倍半萜类化合物的方法及其应用有效
申请号: | 201710978333.5 | 申请日: | 2017-10-18 |
公开(公告)号: | CN107602639B | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 郑晓珂;李孟;曾梦楠;张靖柯;赵璇;吕锦锦;张志广;冯卫生 | 申请(专利权)人: | 河南中医药大学 |
主分类号: | C07H15/203 | 分类号: | C07H15/203;C07H15/20;C07H1/08;A61P5/30;A61P35/00 |
代理公司: | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人: | 聂孟民 |
地址: | 450046 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 北葶苈子中 提取 倍半萜 化合物 方法 及其 应用 | ||
1.一种从北葶苈子中提取的倍半萜类化合物北葶新萜A和北葶新萜B,分子结构式为:
其中,北葶新萜A和北葶新萜B的制备方法是,将北葶苈子230-260℃炒制5-6min,炒制后,每次加北葶苈子10倍重量的水煎煮提取三次,每次1.5h,合并三次提取液,减压浓缩至相当于含生药2g/mL的浸膏状,在室温条件下,浸膏加入浸膏5倍体积量、体积浓度为80%的乙醇醇沉,静置1h,将上清液倒出,再次加入浸膏5倍体积量、体积浓度为80%的乙醇醇沉,如此反复操作4次,合并上清液,浓缩至无醇味,上Dianion HP-20柱,依次用水、体积浓度20%、40%、60%乙醇梯度洗脱,流速6mL/min,每个部位的流动相用量为柱体积的10倍;收集60%乙醇洗脱液,浓缩干燥,得60%乙醇洗脱部位组分A;组分A用组分A5倍重量的水溶解,在20℃下6000r/min离心15min,所得上清液记为水溶物组分B1,离心之后的沉淀记为水不溶物组分B2;组分B2用甲醇溶解,硅胶拌样,组分B2与硅胶重量比1:1,以二氯甲烷和甲醇的混合液为流动相梯度洗脱,流速10mL/min,所用二氯甲烷和甲醇混合液的比例依次为100:0、20:1、10:1、5:1、1:1,每200ml检识一次,每个梯度流动相的用量以茴香醛-浓硫酸薄层检识来判断,3d洗脱完毕,合并二氯甲烷:甲醇=5:1的流份,标为组分C4;组分C4用水溶解,通过ODS柱色谱,依次用水、体积浓度10%、20%、30%、60%甲醇梯度洗脱,流速3ml/min,以茴香醛-浓硫酸薄层检识来判断洗脱终点,每20ml检识一次,2d洗脱完毕,合并60%甲醇洗脱组分标为组分D5,组分D5用半制备HPLC分离,上规格型号为:250×20mm,粒径5μm,孔径12nm的YMC-Pack ODS-AA色谱柱,流动相为体积比25:75的乙腈:三氟乙酸水溶液,三氟乙酸水溶液质量浓度为0.03%,流速5ml/min,收集保留时间tR=5~30min之间的流份,标为组分E1;组分E1通过Sephadex LH-20柱色谱,用甲醇洗脱,流速1ml/min,以茴香醛-浓硫酸薄层检识,合并50~80ml的流份标为组分F1;组分F1通过半制备HPLC,上规格型号为:250×10mm,粒径5μm,孔径12nm的YMC-Pack ODS-AA色谱柱,流动相为体积比22︰78的乙腈:三氟乙酸水溶液,三氟乙酸水溶液质量浓度为0.03%,流速3ml/min,收集保留时间tR=11.0~11.6min的流份,浓缩干燥,得化合物北葶新萜A,收集保留时间tR=17.4~17.9min的流份,浓缩干燥,得化合物北葶新萜B。
2.权利要求1所述的从北葶苈子中提取的倍半萜类化合物北葶新萜A和北葶新萜B在制备雌激素样作用药物中的应用。
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