[发明专利]一种细菌粘附细胞的快速检测方法及应用在审
| 申请号： | 201710978569.9 | 申请日： | 2017-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN107523604A | 公开（公告）日： | 2017-12-29 |
| 发明（设计）人： | 巨向红;石琳;李思东;高振华;雍艳红 | 申请（专利权）人： | 广东海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N21/64 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人： | 刘瑶云,陈伟斌 |
| 地址： | 524088 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 粘附 细胞 快速 检测 方法 应用 | ||
1.一种细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，其检测步骤如下：
S1. 培养细胞，形成单层细胞；
S2. 培养细菌，并加入荧光染料CFSE标记细菌，标记30min～60min后加入终止剂终止反应；
S3. 细胞与荧光染料标记后的细菌以数量比1：300～400共培养2.5h~3.5h，再洗除未粘附的细菌；然后检测细胞的荧光强度，并计算粘附率；
其中，细菌为可粘附但不入侵动物细胞的细菌，细胞为能贴壁生长的动物细胞。
2.根据权利要求1所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S2中CFSE的浓度为50μM～100μM。
3.根据权利要求2所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S2中CFSE的浓度为50μM。
4.根据权利要求1所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S2中进行荧光标记的细菌密度为108～109CFU/mL。
5.根据权利要求1所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S2中CFSE与细菌的体积比为1～2：1。
6.根据权利要求1所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S2中细菌荧光标记的时间为30min。
7.根据权利要求1所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S2中的终止剂为含40%胎牛血清的完全培养基。
8.根据权利要求1所述的细菌粘附细胞的快速检测方法，其特征在于，步骤S3中细胞和细菌共培养的时间为3h。
9.一种权利要求1～8任一所述的快速检测方法在检测药物抑制细菌粘附动物细胞作用中的应用。
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