[发明专利]植物反式激活互作基序及其用途有效
申请号: | 201710979375.0 | 申请日: | 2013-02-01 |
公开(公告)号: | CN107556389B | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | J·皮托利诺;J·李;S·L·伊文思;R·C·布卢 | 申请(专利权)人: | 陶氏益农公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/82;C12N1/19;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人: | 罗天乐 |
地址: | 美国印*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 反式 激活 互作基序 及其 用途 | ||
1.一种人造转录激活物融合蛋白,其组成为:
DNA结合多肽,其特异性结合DNA启动子;和
反式激活结构域互作基序多肽,由选自下组的氨基酸序列组成:SEQ ID NO: 2-4、6-8、108、110、112、114、116和118。
2.权利要求1的人造转录激活物融合蛋白,其中所述DNA结合多肽选自:锌指DNA结合结构域;来自AVRBS3-可诱导基因的共有结合序列或从其工程化的人造结合序列;GAL4;TAL;LexA;Tet阻遏物;LacR;和类固醇激素受体。
3.权利要求1的人造转录激活物融合蛋白,其中所述DNA结合多肽特异性结合选自下组的多核苷酸:SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO:68、和SEQ ID NO: 99。
4.一种核酸分子,包含编码人造转录激活物融合蛋白的多核苷酸,该多核苷酸组成为:
第一多核苷酸,其编码特异性结合DNA启动子的DNA结合多肽;和
第二多核苷酸,其与所述第一多核苷酸合框地连接,该第二多核苷酸编码由选自下组的氨基酸序列组成的反式激活结构域互作基序多肽:SEQ ID NO: 2-4、6-8、108、110、112、114、116和118。
5.权利要求4的核酸分子,其中所述DNA结合多肽选自:锌指DNA结合结构域;来自AVRBS3-可诱导基因的共有结合序列或从其工程构建的人造结合序列;GAL4;TAL;LexA;Tet阻遏物;LacR;和类固醇激素受体。
6.权利要求4的核酸分子,其中所述DNA结合多肽与选自SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68和SEQ ID NO:99的序列特异性结合。
7.权利要求4的核酸分子,其中所述多核苷酸与基因调节元件可操作地连接。
8.权利要求4的核酸分子,其中所述分子是植物转化载体或植物表达载体。
9.权利要求8的核酸分子,还包含选择标志物或筛选标志物。
10.权利要求4的核酸分子,其中所述多核苷酸被整合到宿主细胞的基因组中。
11.权利要求10的核酸分子,其中所述宿主细胞是植物细胞。
12.一种包含权利要求4的核酸分子的细胞,其中所述细胞是酵母细胞。
13.一种用于增加宿主细胞中感兴趣的多核苷酸表达的方法,所述方法包括:
在包含感兴趣的多核苷酸的宿主细胞中起始权利要求1的人造转录激活物融合蛋白的表达,其中该感兴趣的多核苷酸与特异性结合如权利要求1中所述的DNA结合多肽的DNA启动子可操作地连接,从而增加该宿主细胞中感兴趣的多核苷酸的表达,
其中人造转录激活物融合蛋白的表达是通过将编码该人造转录激活物融合蛋白的多核苷酸引入宿主细胞来起始的。
14.根据权利要求13所述的方法,其中将编码该人造转录激活物融合蛋白的多核苷酸引入宿主细胞是通过用包含所述多核苷酸的核酸分子转化宿主细胞来进行的。
15.根据权利要求14所述的方法,其中所述宿主细胞是植物细胞。
16.根据权利要求15所述的方法,其中将编码该人造转录激活物融合蛋白的多核苷酸引入宿主细胞是通过将包含整合在其基因组中的所述多核苷酸的植物与包含所述宿主细胞的植物杂交来进行的。
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