[发明专利]利用群体感应分子诱导从桦褐孔菌中提取三萜类物质方法在审
申请号: | 201710981074.1 | 申请日: | 2017-10-19 |
公开(公告)号: | CN107841523A | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 陈启和;李豪;吴嘉南;牛永武 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12P33/00 | 分类号: | C12P33/00;C12P5/02;C12N1/14;C12N1/38;C12R1/645 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司33224 | 代理人: | 沈自军 |
地址: | 310013 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 群体 感应 分子 诱导 桦褐孔菌中 提取 三萜类 物质 方法 | ||
1.一种利用群体感应分子诱导从桦褐孔菌中提取三萜类物质方法,包括:将活化的桦褐孔菌(Inonotus obliquus)CFCC 83414接入液体培养基,于24-26℃发酵培养8-14天,在发酵第5-8天加入群体感应分子,发酵完成后,分离菌体和发酵液,通过后处理从菌体和发酵液中分离纯化得到三萜类物质;
其中,所述群体感应分子为法尼醇、色醇、对羟基苯乙醇、苯乙醇、茴香脑和香叶醇中的至少一种;
所述三萜类物质为白桦脂醇、白桦脂酸、角鲨烯和羊毛甾醇中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述液体培养基为马铃薯葡萄糖合成培养基和麸皮水浸提液的混合物。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵采用三角瓶发酵,发酵时间为11-14天;培养时,前2-3天转速设为0rpn/min,然后再以90-110rpn/min的转速培养2-3天,之后再以150-180r/min的转速培养。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述群体感应分子为法尼醇。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述法尼醇的加入时间为发酵第6-7天。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,以每升发酵液计,所述法尼醇的添加量为0-300μmol。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述后处理包括将菌体破碎后用乙醇溶液萃取,同时将发酵液用水饱和的正丁醇萃取,之后合并萃取液,浓缩,得到三萜类物质。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述三萜类物质为白桦脂酸。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述后处理包括将菌体破碎后用乙醇溶液萃取,同时将发酵液用乙酸乙酯萃取,之后合并萃取液,浓缩,得到白桦脂酸。
10.根据权利要求7或9所述的方法,其特征在于,萃取方法为:置于23-27℃下超声提取0.8-1.2h。
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