[发明专利]一种用于血液样品前处理的自热固相皂化萃取柱制备方法

说明书

本发明公开了一种用于血液样品前处理的自热固相皂化萃取柱制备方法，包括以下步骤：向空柱管的底端压入出口筛板；出口筛板上填充疏水填料层并压实；疏水填料层上压入隔离筛板；隔离筛板上填充KOH粉末填料层并压实。本发明固相萃取柱为血液样品皂化专用柱。与现有技术相比，本发明的有益效果是能够避免了传统液相皂化中反应时间长、需辅助加热、操作复杂的缺点，将皂化反应与固相萃取技术有机结合，大大缩短了样品的皂化时间，有效而简单的操作增加了样品检测的准确性，提高了检测的灵敏度，提高了检测人员的工作效率。

技术领域

本发明属于萃取柱制备领域，尤其涉及一种用于血液样品前处理的自热固相皂化萃取柱制备方法。

背景技术

皂化作为一种常用的样品预处理技术，可以将目标分析物从脂质样品基质中释放放出来，将甘油酯转化为甘油和脂肪酸盐。皂化反应常被用于测定血液样品中的一些疏水性物质过程中的样品处理，如血液中的生育酚类，多环芳香烃类，脂溶性维生素类，植物甾醇类，类胡萝卜素，矿物油，多氯联苯，胆固醇等。

传统的液-液皂化反应通常反应时间长，需要水浴加热回流或者需要采用特殊仪器进行加热。传统的液-液皂化反应的反应温度一般应保持在室温到混合物的沸点这个范围内，反应时间也从30min到24h不等，或者需要更长的反应时间。所以传统的皂化方法既费时费力，而且材料消耗量大，更难以实现对样品的快速有效分析。

发明内容

本发明的目的在于，针对现有皂化反应用在样品预处理方面存在的上述问题，提供一种用于血液样品前处理的自热固相皂化萃取柱制备方法。

为了实现上述目的，本申请采用的技术方案为：一种用于血液样品前处理的自热固相皂化萃取柱制备方法，包括以下步骤：

S1、向空柱管的底端压入出口筛板；

S2、出口筛板上填充疏水填料层并压实；

S3、疏水填料层上压入隔离筛板；

S4、隔离筛板上填充KOH粉末填料层并压实，制得所述自热固相皂化萃取柱，并真空保存备用。

进一步优化的，所述空柱管为一次性塑料注射器管或者商品型固相萃取柱管，且内经为0.3-5cm。

进一步优化的，所述出口筛板和所述隔离筛板为脱脂棉、滤纸、玻璃棉或多孔陶瓷中的一种。

进一步优化的，所述疏水填料层的高度为0.5-3cm，所述疏水填料层的材料为聚苯乙烯类或聚甲基丙烯酸酯类，所述疏水填料层材料的形态为无孔颗粒状或者是多孔颗粒状，其中多孔颗粒状材料的粒径大小为3-100μm，孔径为

进一步优化的，所述KOH粉末填料层的高度为0.5-3cm，采用的KOH粉末为分析纯或优级纯。

本发明自热固相皂化的原理在于：当滴加蒸馏水浸润KOH粉末填料层，固体KOH的溶解热可使柱体温度迅速上升至60～80℃，同时过量的KOH可以提供高浓度的OH^-，可以促使皂化反应快速进行(5分钟内完全反应)，同时高浓度的KOH可以快速促使血液中的细胞破裂，快速释放目标分析物。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)本发明步骤简单、快捷、安全、有效、花费低、使用溶剂少、无需特殊仪器、省时省力，并可以避免传统皂化中液-液萃取时易发生的乳化现象，因为乳化现象将导致回收率的降低。

(2)本发明摒弃了传统液相皂化在样品前处理过程中费时、费力、费溶剂等缺点，显著降低了皂化时间，且无需额外的加热和固相萃取(SPE)清理步骤，节省大量的时间和手工劳动，并可获得良好的净化效果。该发明可以用于血液样品前处理。

附图说明