[发明专利]一种从蒲公英中提取抗菌成分的方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及中草药提取技术领域，具体涉及一种从蒲公英中提取抗菌成分的方法。

【背景技术】

随着抗生素的广泛应用，细菌的耐药性逐年增加，成为临床医生难以对付的“超级细菌”。同时，抗生素本身具有的毒副作用，对人体和环境也造成威胁。天然药物是从植物、动物和微生物等天然资源中开发出来的药物，具有毒副作用小、耐药性小等优势。目前，在世界范围内的药品市场中，约30％来源于天然产品。从天然产物尤其是从药用植物中寻找新颖的抗菌药物受到国内外研究者的重视。

蒲公英别名黄花地丁、婆婆丁、华花郎等，属于菊科多年生草本植物。蒲公英有利尿、缓泻、退黄疸、利胆等功效。治热毒、痈肿、疮疡、内痈、目赤肿痛、湿热、黄疸、小便淋沥涩痛、疔疮肿毒，乳痈，瘰疬，牙痛，目赤，咽痛，肺痈，肠痈，湿热黄疸，热淋涩痛。治急性乳腺炎，淋巴腺炎，瘰疬，疔毒疮肿，急性结膜炎，感冒发热，急性扁桃体炎，急性支气管炎，胃炎，肝炎，胆囊炎，尿路感染等。研究证明，蒲公英的醇提物对金黄色葡萄球菌耐药菌株、溶血性链球菌有较强的杀菌作用。对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等及卡他球菌也有一定杀菌作用。因此，从蒲公英中提取抗菌成分对抗菌药物的研究具有积极的意义。然而，目前对蒲公英进行提取的研究工作，大多集中在提取和应用其绿原酸上，对其抗菌成分进行的相关研究较少。

【发明内容】

本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，本发明提供一种从蒲公英中提取抗菌成分的方法，该方法通过筛选提取方法和提取溶剂，能够获得蒲公英中的抗菌成分。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

(1)将蒲公英全草去杂，干燥至无水，再粉碎、过筛至50～60目，得蒲公英粉末；

(2)将乙醇加入到超声波提取器中，然后加入蒲公英粉末，蒲公英粉末与乙醇的固液比为1g：70-80ml，乙醇的体积浓度为73-78％，超声波提取器的提取功率为300～400W，提取频率为40～45kHz，提取温度为40～60℃，提取时间为10-20分钟，过滤，得到一次提取液和一次滤渣；

(3)将一次滤渣采用与步骤(2)相同的方法再提取一次，得二次提取液和二次滤渣；将两次提取的提取液合并得醇提物；将醇提物浓缩至无醇味；

(4)将浓缩后的醇提物加水配制成浓度为9-12mg/ml、pH值为5-6的醇提物溶液，所述醇提物溶液经大孔树脂层析分离，先用去离子水除杂，再用体积浓度为10-15％的稀乙醇洗脱除杂，最后用体积比为1:3-4：75的乙醚、正丁醇和三氯乙烷的混合液作为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，洗脱液浓缩后低温冷冻干燥得蒲公英抗菌成分。

本发明中优选地，步骤(1)中所述干燥是于40～50℃温度下恒温干燥，低温干燥有利于保护有效成分不被破坏。

本发明中优选地，步骤(2)中所述乙醇的体积浓度为76％；控制乙醇体积浓度和料液比可以最大限度提高提取物得率。

本发明中优选地，步骤(2)中所述的超声提取的时间为20分钟，步骤(3)中超声提取的时间为10分钟。

本发明中优选地，步骤(4)中所述大孔树脂为D101或H-103。

本发明中优选地，步骤(4)中所述醇提物溶液过大孔树脂的速度为3～5BV/h；去离子水除杂和体积浓度为10-15％的稀乙醇洗脱除杂时的用量分别为3BV和5BV。

综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：

1、本发明通过对蒲公英进行超声波醇提后，在经过大孔树脂层析分离等步骤，从蒲公英中成功提取到了抗菌活性成份，这些活性成份的获得对于蒲公英在抗菌性方面的研究具有积极意义。

2、本发明在紫罗兰的提取过程中，通过控制乙醇的浓度和用量、控制超声提取的条件，通过采用大孔树脂层析分离，先用去离子水除杂，再用体积浓度为10-15％的稀乙醇洗脱除杂，最后用体积比为1:3-4：75的乙醚、正丁醇和三氯乙烷的混合液作为洗脱剂洗脱，通过筛选适合的提取剂、并通过优化提纯工艺，更能有针对性地得到栀子中的抗菌活性成份，得到的提取物抗菌活性较好。

【具体实施方式】

为了更清楚地表达本发明，以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

(1)将蒲公英全草去杂，于40～50℃温度下恒温干燥至无水，再粉碎、过筛至50～60目，得蒲公英粉末；