[发明专利]一种柠檬酸发酵菌丝体水解液回用于柠檬酸发酵的方法

权利要求书

1.一种柠檬酸发酵菌丝体水解液回用于柠檬酸发酵的方法，其特征在于，将柠檬酸发酵菌丝体水解后回用于其发酵培养基中，发酵培养基组成按重量百分比计，配比如下：黑曲霉菌丝体水解液：5-15%，麸皮水解液：5-20%，玉米液化液清液：65-80%，玉米液化液：10-25%；具体步骤如下：

1）黑曲霉菌丝体收集工序：将发酵结束的柠檬酸发酵液经过滤或压滤分离后收集黑曲霉菌丝体；

2）黑曲霉菌丝体水解液制备工序：将黑曲霉菌丝体进行破碎处理，再加入溶菌酶水解制备黑曲霉菌丝体水解液；

3）麸皮水解液制备工序：将麸皮粉碎后加水调浆，再加入淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶进行水解制备麸皮水解液；

4）玉米液化工序：将玉米粉浆输送至喷射液化装置采用连续喷射液化工艺进行液化；

5）玉米液化液清液制备工序：将步骤4）方法得到的玉米液化液进行过滤，即得玉米液化液清液；

6）发酵培养基制备工序：按以下配方向发酵罐中加入各组分，按质量百分比计，各组分占比为：黑曲霉菌丝体水解液：5-15%，麸皮水解液：5-20%，玉米液化液清液：65-80%，玉米液化液：10-25%；

然后通过蒸汽升温消毒，升至80-115℃，恒温15-30分钟，再降温至35-38℃，即制备得到发酵培养基；

7）发酵工序：将培养成熟的柠檬酸发酵种子液接入发酵培养基中，控制发酵温度为35-38℃，进行发酵直至发酵终了；

步骤2）所述的黑曲霉菌丝体水解液制备的具体方法为：黑曲霉菌丝体直接经球磨机粉碎处理后按照质量体积比1:3-5加水混匀或按照质量体积比1:3-5加水调浆后通过胶体磨或均质机破碎处理，然后按照每克菌丝体加入5-20酶单位的溶菌酶，于150-300转/min，35-40℃条件下水解3-12h，即得黑曲霉菌丝体水解液。

2.根据权利要求1所述的一种柠檬酸发酵菌丝体水解液回用于柠檬酸发酵的方法，其特征在于，步骤3）所述的麸皮水解液制备，具体为：将麸皮采用粉碎机粉碎，过100目筛，然后按照质量体积比1:2-5加入水，调浆后按照每克麸皮加入5-10酶单位纤维素酶、5-10酶单位蛋白酶和5-10酶单位淀粉酶于40-90℃水解2-6h，即得麸皮水解液。

3.根据权利要求1所述的一种柠檬酸发酵菌丝体水解液回用于柠檬酸发酵的方法，其特征在于，步骤4）所述的玉米液化过程具体为：采用粉碎机将玉米粉碎，过40目筛通过率≥50%，随后按照质量体积比玉米：水为1:2.8-3.2的比例加55-65℃的水调浆，随后按每克玉米粉加入10-20酶单位的耐高温α-淀粉酶，经二次连续喷射液化，喷射温度为80-130℃，时间为2-6小时，即得玉米液化液。

4.根据权利要求1所述的一种柠檬酸发酵菌丝体水解液回用于柠檬酸发酵的方法，其特征在于，步骤5）所述的过滤方法为采用板框过滤机或卧螺离心机进行过滤。

5.根据权利要求1所述的一种柠檬酸发酵菌丝体水解液回用于柠檬酸发酵的方法，其特征在于，步骤7）所述的柠檬酸发酵液接种量为5-15%，使菌球密度达到2-5*10⁴个/ml。