[发明专利]一种4-羟基-2-吡啶酮类生物碱在制备抗肿瘤产品中的应用

权利要求书

1.一种4-羟基-2-吡啶酮类生物碱的制备方法，其特征是，所述4-羟基-2-吡啶酮类生物碱为Sambutoxin，化学结构为：

制备方法为：采用体积比为80:15:5的乙酸乙酯、甲醇和冰醋酸的混合液对高山猴头菌进行提取获得高山猴头菌提取物浸膏，将所述高山猴头菌提取物浸膏用水分散均匀，再用等体积乙酸乙酯进行萃取，而后乙酸乙酯萃取物继续用石油醚-甲醇两相萃取，将甲醇相进行减压浓缩得到甲醇萃取部位，通过中压液相色谱对所述甲醇萃取部位采用甲醇-水系统梯度洗脱进行分离，将含有4-羟基-2-吡啶酮类生物碱的馏分进行合并获得馏分1，再通过凝胶柱对馏分1采用甲醇系统进行分离，将含有4-羟基-2-吡啶酮类生物碱的馏分进行合并获得馏分2，通过中压液相色谱对馏分2采用甲醇-水系统梯度洗脱进行分离，将含有4-羟基-2-吡啶酮类生物碱的馏分进行合并获得馏分3，再通过凝胶柱对馏分3采用丙酮系统进行分离，将含有4-羟基-2-吡啶酮类生物碱的馏分进行合并获得馏分4，通过正相硅胶色谱法对馏分4进行分离即可获得4-羟基-2-吡啶酮类生物碱；

将高山猴头菌发酵后进行提取制备高山猴头菌提取物浸膏；

第一次采用中压液相色谱进行分离的色谱条件为：固定相为RP-18硅胶，流动相A为水，流动相B为甲醇，洗脱梯度：体积百分数0％B，体积百分数30％B，体积百分数50％B，体积百分数70％B，体积百分数100％B，每个洗脱梯度的流动相总体积为2L；

第二次采用中压液相色谱进行分离的色谱条件为：固定相为RP-18硅胶，流动相A为水，流动相B为甲醇，洗脱梯度：体积百分数60％B，体积百分数70％B，每个洗脱梯度的流动相总体积为1.5L；

所述正相硅胶色谱法采用石油醚与丙酮的体积比为6:1的石油醚-丙酮系统进行分离。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，通过中压液相色谱或凝胶柱进行分离后，对分离后的馏分进行薄层色谱分析，根据薄层色谱分析结果，将含有4-羟基-2-吡啶酮类生物碱的馏分进行合并。