[发明专利]具有同位素的磷酸化合物的制造方法

说明书

本申请是申请日为2012年5月7日、申请号为201280022384.6、发明名称为具有同位素的磷酸化合物的制造方法的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及具有同位素的磷酸化合物的制造方法。

背景技术

作为确认生物体内的化合物的动态的方法，通常使用导入了同位素的标记化合物。前述化合物包括例如DNA和RNA等核酸；前述同位素对生物体没有影响，所以稳定同位素的利用备受瞩目。

其中，导入有稳定同位素的核酸的合成通常预先在单体中导入稳定同位素，将其作为原料而进行多聚核苷酸的合成。并且，为了高灵敏度地检测稳定同位素，前述多聚核苷酸中优选导入多个稳定同位素。然而，根据该方法，为了导入多个稳定同位素，需要对包含A、G、C和T/U的各碱基的全部的单体进行标记化，存在劳力和成本变得极高的问题。

另外，作为稳定同位素的导入方法，公开有将2,2’-环尿苷通过苯甲酸(PhC¹⁸O₂H)进行开环，在糖的2’位导入具有稳定同位素的羟基(-¹⁸OH)的方法(非专利文献1)。然而，该方法只能对特定的具有嘧啶碱基的核苷进行标记化，不能得到具有其他的碱基的核苷。

这样，利用稳定同位素进行标记的劳力和成本方面的问题，不限于前述核酸，对于例如：药物、农药等低分子化合物也同样。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:J.Org.Chem.2008Jan.4；73(1)：309-311

发明内容

因此，本发明目的在于提供容易制造具有同位素的磷酸化合物的方法。

为了达成前述目的，本发明的制造方法的特征在于，其为具有同位素的磷酸化合物的制造方法，包含氧化工序：通过将三价磷化合物用包含同位素的氧化剂进行氧化而合成导入有前述同位素的五价的磷酸化合物。

根据本发明的制造方法，只使用前述包含同位素的氧化剂，就能够容易地制造包含同位素的磷酸化合物。本发明的制造方法对于例如具有磷酸基的核酸的合成、具有磷酸基的农药、药物、磷脂等低分子化合物的合成是有用的。

附图说明

图1为实施例1中¹⁸O标记化多聚尿苷酸的质谱分析谱图。

图2为实施例1中在规定的pH下进行了处理的¹⁸O标记化多聚尿苷酸的质谱分析谱图。

图3为实施例2中导入了¹⁸O的siRNA的Native-PAGE的照片。

图4为表示实施例2中导入了¹⁸O的siRNA的圆二色谱的图。

图5为表示实施例2中人GAPDH基因的mRNA的表达量的相对值的图。

图6为表示实施例3中¹⁸O标记化多聚尿苷酸的浓度与δ¹⁸O[‰]的关系的图。

图7为实施例4中观察导入了¹⁸O的siRNA的细胞内定位的照片。

具体实施方式

本发明的制造方法，如前述，其特征在于，其为具有同位素的磷酸化合物的制造方法，其包含氧化工序：通过将三价磷化合物用包含同位素的氧化剂(以下，称为“同位素氧化剂”)进行氧化而合成导入有前述同位素的五价的磷酸化合物。

根据本发明的制造方法，通过前述同位素氧化剂，三价磷化合物的三价磷被氧化为五价磷，与此同时地，来源于前述同位素氧化剂的前述同位素与前述五价磷键合。因此，只进行通过前述同位素氧化剂进行的氧化反应，就能够得到导入有同位素的五价的磷酸化合物。因此，根据本发明，可以说例如：能够将导入有同位素的磷酸化合物的用途进一步推广。

本发明如前述，其特征在于，使用前述同位素氧化剂将三价磷化合物氧化；对于其他的构成以及其他的条件，没有特别的限定。