[发明专利]一种用于培养肝细胞的完全培养基在审
| 申请号： | 201711002648.2 | 申请日： | 2017-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN109694844A | 公开（公告）日： | 2019-04-30 |
| 发明（设计）人： | 彭青;高毅;李海燕;李阳;梁康檐;黎少;翁骏 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学珠江医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京市立方律师事务所 11330 | 代理人： | 刘延喜 |
| 地址： | 510282 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肝细胞 完全培养基 培养肝细胞 混合血清 代谢酶基因 肝癌细胞系 基础培养基 表达水平 门静脉血 胎牛血清 代谢酶 色素 存活 生长 应用 保证 | ||
1.一种用于培养肝细胞的完全培养基，其特征在于，所述完全培养基组分包括基础培养基和混合血清；所述混合血清由门静脉血清和胎牛血清组成。
2.如权利要求1所述的完全培养基，其特征在于，所述门静脉血清采用至少一种哺乳类动物门静脉血清。
3.如权利要求2所述的完全培养基，其特征在于，所述门静脉血清的制备方法包括以下步骤：
(1)收集新鲜的门静脉血液；
(2)将所述门静脉血液离心，取下层清液；
(3)在50℃-60℃下加热所述下层清液至灭活补体，得灭活清液；
(4)过滤所述灭活清液，收集得门静脉血清。
4.如权利要求3所述的完全培养基，其特征在于，所述门静脉血液离心的时间为12min或以上。
5.如权利要求3所述的完全培养基，其特征在于，将所述门静脉血液以2000xg-5000xg的离心力进行离心。
6.如权利要求3所述的完全培养基，其特征在于，所述加热下层清液的时间为30min或以上。
7.如权利要求3所述的完全培养基，其特征在于，所述加热下层清液的温度为56℃。
8.如权利要求3所述的完全培养基，其特征在于，过滤所述灭活清液，采用滤孔直径为0.22μm的微孔滤膜。
9.如权利要求2所述的完全培养基，其特征在于，所述哺乳类动物门静脉血清采用猪门静脉血清。
10.如权利要求1所述的完全培养基，其特征在于，按照体积比计算，所述混合血清至少占所述完全培养基的10％。
11.如权利要求1所述的完全培养基，其特征在于，按照体积比计算，所述门静脉血清占所述混合血清的比例为30％～80％。
12.如权利要求11所述的完全培养基，其特征在于，按照体积比计算，所述门静脉血清占所述混合血清的比例为30％、50％、70％、80％的任一比例。
13.如权利要求1所述的完全培养基，其特征在于，所述完全培养基还包括1％体积比的抗生素。
14.如权利要求1所述的完全培养基，其特征在于，所述基础培养基为DMEM高糖基础培养基。
15.一种用于培养肝细胞的完全培养基，其特征在于，所述完全培养基为权利要求1-14任意一项所述的完全培养基，所述完全培养基用于培养肝癌细胞系HepG2。
16.一种用于培养肝细胞的完全培养基，其特征在于，所述完全培养基为权利要求1-14任意一项所述的完全培养基，所述完全培养基用于提升肝细胞的药物代谢相关的酶的对应基因表达。
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