[发明专利]一种用于毛细管电泳的混合聚合物溶液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及毛细管电泳领域，具体是涉及一种用于毛细管电泳的混合聚合物溶液及其制备方法。

背景技术

聚丙烯酰胺是目前所有聚合物中DNA分离最好的介质。但聚丙烯酰胺不具有自涂敷能力，必须在毛细管内壁上加涂层，消除毛细管内壁对DNA的吸附和电渗流，才能有效的分离DNA片段。另外，高分子量聚丙烯酰胺粘度较高，需要高压才能将其灌入毛细管中。

聚N,N-二甲基丙烯酰胺具有很强的自涂敷能力，可消除DNA的吸附和降低电渗流，其粘度也远远低于聚丙烯酰胺，但其分离DNA片段的效果低于聚丙烯酰胺。

若把这两种聚合物有机地结合起来，就可以得到理想的DNA分离介质。以聚丙烯酰胺为主链，以聚N,N-二甲基丙烯酰胺为支链合成梳形聚合物。这种梳形聚合物能够有效地抑制电渗流，不需要在毛细管内壁加任何涂层，就能有效的分离DNA片段。

中国专利文献CN102276853A于2011年12月14日公开了一种具备毛细管自涂敷作用的共混共聚物凝胶及其制备方法，所述发明提供的制备方法是在溶胶缓冲液中，将自涂敷聚合物(聚N,N-二甲基丙烯酰胺)和聚合了自涂敷聚合物单体(聚N,N-二甲基丙烯酰胺-丙烯酰胺无规共聚物)的筛分聚合物混合，得到共混共聚物凝胶。

中国专利文献CN102220599A于2011年10月19日公开了一种用作毛细管凝胶电泳筛分介质的准互穿聚合物网络和其制备方法以及用途，所述发明提供一种长链、短链线性聚N,N-二甲基丙烯酰胺和聚丙烯酰胺-N,N-二甲基丙烯酰胺无规共聚物彼此缠结、互穿，形成聚合物链的准互穿聚合物网络。

但是所述两项发明的合成步骤繁琐，而且分子量要求较大，在实验室很难实现。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于毛细管电泳的混合聚合物溶液及其制备方法，本发明所制备的混合聚合物溶液能够在毛细管电泳过程中具有良好的DNA分离能力和自涂敷能力，而且其制备方法简单，能在实验室中操作制备，同时，所制备的产品可产生较大的经济效益。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

用于毛细管电泳的混合聚合物溶液的制备方法，是将聚丙烯酰胺、聚N,N-二甲基丙烯酰胺和溶胶缓冲液混合，得到所述混合聚合物溶液。

作为一种优选的技术方案，需要说明的是，所述聚丙烯酰胺和聚N,N-二甲基丙烯酰胺的质量配比是(1.3-1.7)：(0.8-1.2)，优选配比是1.5:1。

作为一种优选的技术方案，需要说明的是，所述聚丙烯酰胺、聚N,N-二甲基丙烯酰胺和溶胶缓冲液的配比是(1.3-1.7)g：(0.8-1.2)g：(45-55)ml，优选配比是1.5g：1g：50ml。

作为一种优选的技术方案，需要进一步说明的是，所述聚丙烯酰胺的粘均分子量为10-100万，优选为20万，所述聚N,N-二甲基丙烯酰胺的粘均分子量为1-50万，优选为5万。

作为一种优选的技术方案，需要进一步说明的是，所述聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺单体在溶剂、引发剂作用下反应得到的聚合物，所述反应是在无氧条件下进行的，所述反应的温度是35℃，反应时间为90min。

作为一种优选的技术方案，需要进一步说明的是，所述溶剂包括去离子水、异丙醇，所述引发剂包括过硫酸铵、N,N,N’,N’-四甲基二乙胺；所述丙烯酰胺单体、去离子水、异丙醇、过硫酸铵、N,N,N’,N’-四甲基二乙胺配比为(20-30)g：(180-270)ml：(5.24-7.86)ml：(1.0-2.0)ml：(1.0-2.0)ml，优选配比是25g：222ml：6.55ml：1.25ml：1.25ml。

作为一种优选的技术方案，需要进一步说明的是，所述聚N,N-二甲基丙烯酰胺是由N,N-二甲基丙烯酰胺在溶剂、引发剂作用下反应得到的聚合物，所述反应是在无氧条件下进行的，所述反应的温度是50℃，反应时间为3h。

作为一种优选的技术方案，需要更进一步说明的是，所述溶剂包括去离子水、异丙醇，所述引发剂包括过硫酸铵、N,N,N’,N’-四甲基二乙胺；所述N,N-二甲基丙烯酰胺、去离子水、异丙醇、过硫酸铵、N,N,N’,N’-四甲基二乙胺配比为(20-30)ml：(180-270)ml：(6.6-8.6)ml：(0.5-1.0)ml：(0.5-1.0)ml，优选配比是24ml：220ml：7.6ml：0.625ml：0.625ml。

作为一种优选的技术方案，需要更进一步说明的是，所述溶胶缓冲液包括电泳缓冲液、尿素、去离子水。