[发明专利]miR‑181a作为海洛因成瘾的生物标记物及其在制备抗海洛因复吸药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种用于检测海洛因成瘾的生物标记物miR-181a及其在制备抗海洛因复吸药物中的应用。

背景技术

药物成瘾(drug addiction)作为一种慢性复发性脑部疾病，是一种严重危及人类健康并受全球关注的公共卫生问题，给社会和经济带来严重危害。海洛因作为传统阿片类毒品，在药物成瘾中扮演着重要角色。

海洛因作为阿片受体激动剂之一，主要通过激活位于中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)GABA神经元阿片受体，通过突触前抑制，下调GABA神经元功能，使得多巴胺神经元脱抑制，释放多巴胺增加从而上调奖赏环路，导致海洛因成瘾的发生与发展。慢性海洛因使用会导致躯体和精神依赖，主要涉及了VTA到伏隔核(nucleus accumbens,NAc)脑区多巴胺能投射系统的奖赏通路发生了适应性改变，如神经与突触结构和功能的可塑性改变。高复吸率是海洛因成瘾戒断的难点，目前还没有特别有效的干预方法，其原因之一是由于药物成瘾过程中，中枢神经系统发生了适应性改变，正常认知功能的损害导致冲动控制等行为的抑制功能减弱；另一方面是戒断综合征、心理渴求及一些生活事件等与毒品有关的线索均可以诱导复吸行为发生。目前关于海洛因成瘾是如何导致认知功能损害或造成海洛因复吸行为的详细机制还未完全清楚，因而缺乏行之有效的防复吸方法。

miRNA是长18～24个左右核苷酸大小的一类非编码单链RNA，其通过5′端种子序列与靶mRNA的3′端非编码区(3＇Untranslated Regions，3′UTR)通过碱基互补配对，再与RNA诱导的沉默复合体(RSC)结合，剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译，从而起到转录后调控靶基因的表达。表观遗传学是指不涉及基因序列的改变，而是经过表观遗传修饰后调控机体基因的表达。表观遗传学包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA(miRNA，lncRNA等)调控。

因此，有必要提供一种新型的抗海洛因复吸药物，以减少海洛因成瘾后复吸行为的发生。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种用于检测海洛因成瘾的生物标记物miR-181a及其在制备抗海洛因复吸药物中的应用，以减少海洛因成瘾后复吸行为的发生。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：一种用于检测海洛因成瘾的生物标记物，所述生物标记物为hsa-miR-181a。

优选地，所述hsa-miR-181a的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选地，所述生物标记物为人外周血中的hsa-miR-181a。

本发明还提供了一种rno-miR-181a在制备抗海洛因复吸药物中的应用，通过过表达rno-miR-181a，以抑制海洛因复吸行为。

优选地，所述rno-miR-181a的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选地，通过转染带有所述rno-miR-181a核苷酸序列的慢病毒过表达所述rno-miR-181a。

优选地，所述rno-miR-181a用于下调MeCP2蛋白的表达量以抑制海洛因复吸行为。

优选地，所述rno-miR-181a用于下调MeCP2-mRNA的表达，所述MeCP2-mRNA为所述MeCP2蛋白的信使RNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

优选地，所述rno-miR-181a与靶基因MeCP2的3＇UTR特异性结合，以下调所述MeCP2蛋白的表达，所述MeCP2蛋白为所述靶基因MeCP2编码的蛋白质。

与现有技术相比，本发明的优点在于：可通过检测本发明提供的所述hsa-miR-181a的表达水平的变化量，作为一种海洛因成瘾行为相关的生物指标，采用分子生物学技术检测灵敏度高；可通过在体内过表达rno-miR-181a，以减少海洛因成瘾的复吸行为，为海洛因成瘾和复吸治疗提供新的分子靶标。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为健康对照组和海洛因成瘾组的hsa-miR-181a表达情况数据图；

图2为hsa-miR-181a对海洛因成瘾的诊断价值的ROC曲线图；