[发明专利]一种混合藻提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种混合藻提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将螺旋藻、小球藻和雨生红球藻混合，得到300～500mL的混合藻液，离心，弃上清，得藻泥；

S2：藻泥加入pH7.0的磷酸盐缓冲液后低温研磨，离心，得到沉淀和上清液；在上清液中加入硫酸铵溶液，静置18～24h，离心，弃上清，得提取物a；

S3：取步骤S2中的沉淀，加入石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶液，萃取，过滤，重复2次以上，得到沉淀和萃取液，将萃取液干燥后加入1～3倍体积的氢氧化钾甲醇溶液，搅拌30～60min后静置2～3h，按体积比1：0.03～0.08加入2～5％的盐酸溶液，离心分离，取上层，得提取物b；

S4：取步骤S3中的沉淀，按料液比1：1～2加入2～3％氢氧化钠溶液，按溶液体积的15～20％添加木瓜蛋白酶，55～65℃条件下搅拌3～4h，灭酶，离心，取上清液浓缩，加入乙醇-甲醇溶液，静置5～7h，离心，得提取物c和上清液；上清液中加水稀释60～80％后，用乙酸乙酯等体积萃取2～3次，乙酸乙酯层浓缩得提取物d；

S5：合并上述提取物a、提取物b、提取物c和提取物d，干燥，得混合藻提取物。

2.根据权利要求1所述的一种混合藻提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中的离心参数为1000～2000rpm离心3～5min；所述步骤S2中的第一次离心参数为2000～3000rpm离心5～10min，第二次离心的参数为10000～15000rpm离心5～10min。

3.根据权利要求1所述的一种混合藻提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中石油醚-乙酸乙酯-丙酮的体积比为70～80:10～15:5～20，萃取条件为35～45℃萃取7～8h。

4.根据权利要求1所述的一种混合藻提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中乙醇-甲醇的体积比为78～85:15～22。

5.根据权利要求4所述的一种混合藻提取物的制备方法，其特征在于，步骤S4为，取步骤S3中的沉淀，按料液比1：1～2加入2～3％氢氧化钠溶液，按溶液体积的15～20％添加木瓜蛋白酶55～65℃条件下搅拌3～4h后，冷却，按溶液体积的0.1～0.2％加入饱和氯化钠溶液，搅拌20～30min，灭酶，按溶液体积的0.1～0.5％加入质量分数为1～2％氢氧化钾溶液，搅拌5～10min，离心，取上清液浓缩，加入乙醇-甲醇溶液，静置5～7h，离心，得提取物c和上清液；上清液中加水稀释60～80％后，用乙酸乙酯等体积萃取2～3次，乙酸乙酯层浓缩得提取物d。

6.一种混合藻提取物，其特征在于，通过权利要求1的混合藻提取物的制备方法制备而得。

7.根据权利要求6所述的一种混合藻提取物，其特征在于，所述混合藻提取物在制备抗氧化、抑菌药物制剂中应用。