[发明专利]一种高效的易成花荔枝新种质育种方法

权利要求书

1.一种高效的易成花荔枝新种质育种方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)父母本的选择：利用纯合“EFT”型荔枝的鉴定方法，确保父母本至少有一方为纯合“EFT”型荔枝；

(2)人工采集父本花粉：确定杂交实验所需的父本荔枝品种后，在父本雄花盛花期采集发育成熟而未开裂的花药，然后用硅胶干燥剂干燥10-12h使花药开裂，再用筛子过筛收集花药于保存管中，短时间保存(一个星期左右)可存放于4℃冰箱，长时间保存需在液氮中超低温保存；

(3)母本花穗人工套袋隔离花粉：确定杂交实验所需的母本荔枝品种后，在母本雌花盛开期去除花穗上少量的雄花和已经开放的雌花，然后套袋隔离外界花粉；

(4)人工授粉：等到母本雌花开放之后，摘下花粉隔离袋取出事先准备好的父本花粉，用细毛笔沾取花粉涂抹雌花进行人工授粉，授粉结束后再套上花粉隔离袋7-10d，在摘袋之后同时减去未经授粉的雌花和未开放的花蕾，只保留授过粉的雌花；

(5)在授粉工作结束之后加强授粉母本树的水肥和病虫害管理，等到杂交果实成熟后收集杂交种子，进行催芽定值。

2.根据权利要求1所述的高效的易成花荔枝新种质育种方法，其特征在于，步骤(1)中纯合“EFT”型荔枝的鉴定方法为：以待检测的荔枝DNA样品为模板进行PCR扩增，如果引物EFT-F和EFT-R扩增到262bp大小的目的条带，引物DFT-F和DFT-R扩增不到202bp大小的目的条带，则表明待检测荔枝样品为纯合“EFT”型荔枝，可作为荔枝杂交实验中亲本一方。

3.根据权利要求2所述的高效的易成花荔枝新种质育种方法，其特征在于，所述的引物EFT-F为Seq ID NO.1所示的序列，所述的引物EFT-R为Seq ID NO.2所示的序列，所述的引物DFT-F为Seq ID NO.3所示的序列，所述的引物DFT-R为Seq ID NO.4所示的序列。

4.一种检测纯合“EFT”型荔枝的PCR试剂盒，其特征在于，所述的PCR检测试剂盒反应体系共25μL，具体组成如下：DNA模板1μL，上下游引物各1μL，2×Taq PCR MasterMix(TIANGEN)12.5μL，水9.5μL。

5.根据权利要求4所述的检测纯合“EFT”型荔枝的PCR试剂盒，其特征在于，所述的上下游引物分别为Seq ID NO.1、Seq ID NO.2、Seq ID NO.3以及Seq ID NO.4所示的序列。