[发明专利]一种用于肾透明细胞癌诊治的生物标志物

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种肾透明细胞癌miRNA标记物及其应用，更具体的涉及mir-2355及其成熟miRNA。

背景技术

肾细胞癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，约占成人恶性肿瘤的3％。肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma，ccRCC)是最常见和最具侵袭性的肾癌组织学亚型，占所有肾癌的75％～80％。对于早期和局限性ccRCC患者，手术仍是最有效的治疗方式，但是由于缺乏有效的生物学标记物，约有40％的确诊患者已处于晚期。早期或局限性肿瘤患者术后发生转移的概率也高达20％～40％，且肾透明细胞癌对放疗、化疗等常规的抗癌治疗不敏感，总体生存率很低。在我国肾癌发病率呈逐年增多的趋势，且向低龄化发展，半数患者首次就诊时已经是晚期。目前肾癌的治疗并不能取得令人满意的结果，肾癌未能手术切除者3年生存率不足5％，5年生存率在2％以下。因此，寻找一种能早期诊断及有效治疗肾癌的方法显得尤为重要，已经成为临床上迫切需要解决的实际问题。

MicroRNAs(miRNAs)是一类重要的非编码的小RNA，长度在19到25个核苷酸，在不同生理病理过程中调控基因的表达。包括发育时间、细胞分化、细胞凋亡、肿瘤发生发展等。成熟miRNAs的种子序列特异性结合与目标mRNA在3’-非编码区而促进目标mRNA断裂或抑制蛋白翻译。近年来研究发现miRNAs在肿瘤中的潜在作用，因此开辟了肿瘤治疗的新领域。

生物信息学(Bioinformatics)是利用数学、信息学、统计学和计算机科学的方法研究生物学的问题。在1970年，Paulien Hogeweg和Ben Hesper依据在生物系统中研究信息的处理提出了生物信息学。随着互联网的普及和人类基因组计划的完成，生物学数据库如雨后春笋般迅速出现和成长。但这些数据库许多仅仅提供了原始的生物信息资源，亟需科研工作者利用生物信息学进行深入的分析，从这些数据中挖掘出有价值的信息。简而言之，我们运用生物信息学可以从基因组相关生物信息中获取海量数据，然后对它们进行加工、分析和解释，从而可进一步认识生物的代谢、发育、分化、肿瘤形成等规律。鉴于肾癌逐渐成为严重危害人类生命和健康的常见肿瘤之一，而ccRCC是肾癌最常见的一种类型，本发明利用生物信息学分析ccRCC相关分子标志物，通过上述分析筛选ccRCC及癌旁组织差异表达基因，分析mir-2355及其成熟miRNA对ccRCC诊断、预后判断的价值，这为ccRCC诊断、预后及后续靶向治疗研究提供了基础。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种可用于诊治肾透明细胞癌的miRNA标记物。相比传统的肾透明细胞癌的诊断方法，使用miRNA标记物来诊断肾透明细胞癌具有及时性、灵敏性，从而使患者在疾病早期就能知晓疾病风险，从而采取相应的预防和治疗措施。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了mir-2355及其成熟miRNA在制备诊断肾透明细胞癌的产品中的应用。

所述mir-2355的序列见SEQ ID NO1：cagacgugucauccccagauacaauggacaauaugcuauuauaaucguauggcauuguccuugcuguuuggagauaauacugcugac。

所述mir-2355能在人细胞内被剪切并表达成其成熟miRNA，具体为miR-2355-5p或miR-2355-3p，序列见SEQ ID NO 2：auccccagauacaauggacaa和SEQ ID NO 3：auuguccuugcuguuuggagau。

应当知道，本发明的mir-2355及其成熟miRNA包括组成型核酸分子的功能等同物，即变体，其显示完整mir-2355及其成熟miRNA核酸分子相同的功能，它们可能通过核苷酸残基的缺失、置换或者插入而突变。

本发明的mir-2355是部分自互补的，以形成双链结构，其成熟miRNA核酸分子主要呈单链形式，本发明的核酸分子可以是RNA、DNA、PNA、LNA的形式。

本发明提供了mir-2355及其成熟miRNA在高通量测序平台中的应用。所述产品通过高通量测序技术、探针杂交技术、基因芯片技术或荧光定量PCR技术检测mir-2355及其成熟miRNA的表达水平。

进一步，所述荧光定量PCR技术包括特异性扩增mir-2355及其成熟miRNA的引物；所述基于探针杂交技术包括与mir-2355及其成熟miRNA的核酸序列杂交的探针。