[发明专利]一种检测黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性的方法及其应用有效
| 申请号： | 201711015960.5 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN107574234B | 公开（公告）日： | 2020-05-29 |
| 发明（设计）人： | 陈宏;程杰;曹修凯;马云;白跃宇;蓝贤勇;雷初朝;胡沈荣 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 黄牛 acvr1 基因 核苷酸 多态性 方法 及其 应用 | ||
1.一种检测黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性的方法在黄牛分子标记辅助选择育种中的应用，其特征在于：所述的检测黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性的方法，包括以下步骤：
以待测黄牛基因组DNA为模板，以引物对1F为引物，PCR扩增黄牛ACVR1基因部分片段，用限制性内切酶RspRSⅡ或RspRSⅡ的同裂酶酶切PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳结果鉴定黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性位点的基因型；
所述引物对1F为：
正向上游引物：5’-TAAAAGGCGCAATCAAGAACGCC-3’；
反向下游引物：5’-AACTCACGTAAGCGTGCCAG-3’；
所述黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性位点的基因型为：CC基因型表现为264bp的一条条带；TT基因型表现为239bp的一条条带；CT基因型表现为264bp和239bp的两条条带；
所述的在黄牛分子标记辅助选择育种中的应用是指黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性位点的CC基因型或C等位基因可作为黄牛胸深性状选择的DNA标记。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PCR扩增的反应程序包括以下步骤：95℃预变性5min；94℃变性30s，65℃退火30s，72℃延伸30s，38个循环；72℃延伸10min。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述黄牛ACVR1基因单核苷酸多态性位点定位于牛参考序列AC_000159.1第41793位。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述同裂酶选自限制性内切酶MseⅠ。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述电泳采用的琼脂糖凝胶的质量浓度为3.5％。
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