[发明专利]提高桃杂交成苗率的方法

说明书

技术领域

本发明涉及到一种提高桃杂交成苗率的方法，属于植物育种技术领域。

背景技术

在桃育种过程中，受各种因素的影响，桃杂交授粉成功率及早熟桃胚培养成功率达不到100％，所以种子处理成苗率在后期显得尤为重要。桃的常规育种方法为：采收成熟果实后，先削去外面的果肉，露出种核，再在相对干净的地方，用铁锤敲破种核，取出种仁，期间用力不当会将种仁敲碎，后放到烧杯中于超净工作台上进行消毒处理，先75％酒精消毒5秒，且要求不停晃动，然后消毒好的无菌水冲洗6次，再放到0.1％升汞中进行消毒5分钟，期间不停晃动，后无菌水冲洗6次，然后接种到培养基或培养皿中。此方法的缺点是消毒前果实去果肉浪费很多的人力，75％酒精消毒时间以秒为单位较难掌握，0.1％升汞消毒，升汞属于剧毒药品，前后共需要无菌水冲洗12次，给消毒工作带来一定的麻烦。且早熟桃胚培养处理过程复杂，有时大量果实成熟时在较短时间内较难完成接种工作，需将果实放置冷库，但成熟度较高果实贮藏时容易烂果，由于交叉污染，影响优质果率，进而影响胚培养成功率。且由于早熟桃胚培苗在培养室培养时，长出的叶片或茎段由于靠近管壁生长或一些特殊情况，导致生长叶片或茎段枯萎，植株不能正常生长，进而影响成苗率。

另外传统中晚熟桃处理采用培养皿处理技术是在培养皿底部平铺一层棉花以达到保湿的效果，在种子发芽后，根系会钻到棉絮下面，不易观察根系生长的长短，不能很好的掌握播种时间。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高桃杂交成苗率的方法。

本发明提供如下技术方案：一种提高桃杂交成苗率的方法,包括以下步骤：

A、桃果实的采收：早熟桃在果实七成熟时采收，中晚熟桃在果实成熟时采收；

B、早熟桃消毒：整果放置到75％酒精中进行第一次消毒处理，时间5～10分钟，然后直接从酒精中捞出，放置到20％的次氯酸钠溶液中进行第二次消毒处理，时间15～30分钟，最后从次氯酸钠溶液中取出，在超净工作台通过剪刀将果实剪开，取出种仁直接接种到培养基中；

中晚熟桃消毒：剪开桃核，取种仁，种仁置于75％酒精消毒2分钟，然后无菌水冲洗6次，放置到培养皿中；

C、培养：将早熟桃种仁放置于试管培养，试管培养为在试管中加入灭菌处理的改良WPM培养基，投入种仁后封口膜封口，后置于3±2℃环境低温处理3个月；

其中每一升改良WPM培养基中包括如下:

1650mg硝酸铵、1900mg硝酸钾、440mg二水氯化钙、370mg七水硫酸镁和170mg磷酸二氢钾，提供大量元素；

6.2mg硼酸、22.3mg四水硫酸锰、8.6mg七水硫酸锌、0.25mg二水钼酸钠和0.25mg五水硫酸铜，提供微量元素；

37.2mg乙二胺四乙酸二钠和27.4mg硫酸亚铁，提供铁盐；

1.0mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、0.5mg烟酸、2mg甘氨酸和l00mg肌醇，提供有机物；

琼脂粉和蔗糖；

将中晚熟桃种仁放置于培养皿培养，培养皿培养为在培养皿中放置4层滤纸，加入无菌水，将种仁平放在滤纸上，盖上培养皿盖，保鲜膜封口以保湿；

D、中晚熟桃种子播种：待培养皿中的种子胚根长到3cm以上播种，播种前将塑料钵中的营养土浇透水，在塑料钵营养土中间戳小洞，将种子胚根放入其中，子叶留在洞口外，最后在上面覆盖一层干土，保湿；

早熟桃苗移栽：待培养基中种胚胚根萌动，放置于组培室进行培养5周后移栽，移栽前穴盘营养土浇透水，去子叶，将植株根系植入土中，并压实、保湿。

优选的，步骤C中试管中倒入培养基，高度在5cm以上；直径6cm的培养皿加水量为5毫升，直径12cm的培养皿加水量为8毫升。

优选的，步骤D中种胚胚根萌动至长度为0.5～1cm时移入组培室，叶片5片以上时移栽。

本发明早熟桃果实七成熟时采收，而非传统的果实成熟时采收，可提高果实采收后在低温的贮藏时间，进而保证完整果率。且七成熟的果实果肉较脆，在取种时，只要剪刀对准位置，可以轻松将果核打开，取出种仁。

本发明采用整果消毒技术，不仅省工省力，而且时间掌握比较容易，在很长时间范围内都不会对种子产生影响，剪刀取种只要剪开种核就行，种子不需再消毒就可接种到培养基中。整果消毒法大大提高杂交果实的成苗率，污染率可控制在0～5％之间。

本发明对WPM培养基做了较大调整，可促进冷藏后的种仁在子叶边重新长出新芽，这样可以确保植株正常生长，进而提高成苗率。