[发明专利]一种23-醛积雪草酸、制备方法和在干细胞领域的应用

说明书

本发明公开了一种23‑醛积雪草酸、制备方法和在干细胞领域的应用。本发明提供了一种新的积雪草酸衍生物—23‑醛积雪草酸，并提供了该23‑醛积雪草酸的制备方法，步骤包括：步骤S1，生物转化：取梅林青霉孢子悬浮液接入无菌液体培养液中培养2d；无菌条件下取适量积雪草酸加入无菌液体培养液中，继续培养3d；步骤S2，分离纯化：培养液过滤取滤液，上样于大孔树脂，用40％、75％的乙醇水溶液洗脱，收集75％乙醇洗脱液，浓缩后用反相制备液相色谱分离，根据色谱图收集23‑醛积雪草酸对应的洗脱流份。申请人研究发现，23‑醛积雪草酸可以诱导骨髓间充质干细胞成骨分化。

技术领域

本发明属于化学领域，涉及一种23-醛积雪草酸、制备方法和在干细胞领域的应用。

背景技术

积雪草酸，又名亚细亚酸，是天然植物积雪草的三萜提取物的主要成分之一，具有乌苏烷型骨架结构。积雪草酸及其衍生物具有广泛的生物活性，包括抗菌、抗病毒、抗阿尔茨海默病、保护心脑血管以及抗肿瘤等作用(参考文献：积雪草酸A环开环衍生物的合成及体外抗肿瘤活性研究，中国新药杂志2017年第26卷第10期)。

微生物转化法可以实现很多化学合成无法实现的结构修饰。对积雪草酸的微生物转化是获得新型积雪草酸衍生物的重要手段。

发明内容

本发明的目的在于提供一种23-醛积雪草酸、制备方法和在干细胞领域的应用，23-醛积雪草酸为积雪草酸的衍生物。

实现本发明上述目的技术方案如下：

一种23-醛积雪草酸，其化学结构如下：

一种23-醛积雪草酸的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1，生物转化：取活化后的梅林青霉斜面菌种，用无菌水冲洗斜面上的孢子，振摇，得梅林青霉孢子悬浮液；取适量孢子悬浮液接入无菌液体培养液中培养2d；无菌条件下取适量积雪草酸加入无菌液体培养液中，继续培养3d；

步骤S2，分离纯化：培养液过滤取滤液，上样于AB-8型大孔吸附树脂，依次用体积百分浓度为40％、75％的乙醇水溶液洗脱，收集75％乙醇洗脱液，浓缩后用反相制备液相色谱分离，流动相为甲醇-水-三氟乙酸(60:40:3-7,V/V/V)，根据色谱图收集23-醛积雪草酸对应的洗脱流份，浓缩干燥即得所述23-醛积雪草酸。

23-醛积雪草酸可能由梅林青霉通过如下生源途径转化得到：

优选地，步骤S1于25℃、150r/min条件培养。

优选地，所述液体培养液为PDB培养基。

优选地，所述积雪草酸浓度为0.4-0.6mg/mL。

所述的23-醛积雪草酸在诱导骨髓间充质干细胞成骨分化方面的应用。

本发明的突出优点：

本发明提供了一种新的积雪草酸衍生物—23-醛积雪草酸，并提供了该积雪草酸衍生物的制备方法，申请人研究发现，23-醛积雪草酸可以诱导骨髓间充质干细胞成骨分化，可以用于制备诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的试剂；本发明提供的制备方法步骤简单，易于大生产。

附图说明

图1为采用反相制备液相色谱分离75％乙醇洗脱物的色谱图；

图2为骨髓间充质干细胞成骨分化的茜红素染色结果图。

具体实施方式

下面就结合实施例具体介绍本发明的实质性内容，由于篇幅原因，实验过程的描述无法做到非常详细，凡是实验中未详细描述的部分均为本领域技术人员熟知的常规操作。