[发明专利]一种环状芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201711018444.8 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN107586768B | 公开（公告）日： | 2020-08-18 |
| 发明（设计）人： | 杜昱光;贾培媛;冯翠;焦思明;任立世;程功 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12P19/26;C12P19/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京方安思达知识产权代理有限公司 11472 | 代理人： | 陈琳琳;张红生 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 环状 芽孢 杆菌 聚糖 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种含环状芽孢杆菌壳聚糖酶基因的重组表达载体，其特征在于：所述环状芽孢杆菌壳聚糖酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述表达载体为pGBG1，表达载体pGBG1通过如下方式获得：
将表达载体pPIC9中的如SEQ ID NO.4所示信号肽序列进行密码子优化，获得适合在毕赤酵母中表达的如SEQ ID NO.5所示信号肽序列；
利用Nsi I/Xho I双酶切，将表达载体pPIC9中的如SEQ ID NO.4所示信号肽序列替换为如SEQ ID NO.5所示的信号肽序列，得到表达载体pGBG1。
2.一种环状芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法，所述方法包括如下步骤：
将权利要求1所述的重组表达载体导入毕赤酵母细胞，诱导并获得分泌表达的环状芽孢杆菌壳聚糖酶。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述毕赤酵母细胞为GS115。
4.权利要求1所述的含环状芽孢杆菌壳聚糖酶基因的重组表达载体在壳聚糖或几丁质降解中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：经由权利要求1所述的含环状芽孢杆菌壳聚糖酶基因的重组表达载体所制备的环状芽孢杆菌壳聚糖酶单独用于壳聚糖降解制备获得壳寡糖；或者经由权利要求1所述的含环状芽孢杆菌壳聚糖酶基因的重组表达载体所制备的环状芽孢杆菌壳聚糖酶与其他几丁质酶或壳聚糖酶混合使用，协同降解壳聚糖或几丁质。
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