[发明专利]一种鉴别泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记、引物及方法在审
| 申请号： | 201711024496.6 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN107604079A | 公开（公告）日： | 2018-01-19 |
| 发明（设计）人： | 高天翔;肖家光;杨天燕;陈治;张秀梅 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙)33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省舟山市普陀海*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 泰国 多鳞鱚隐存种 多鳞鱚 分子 标记 引物 方法 | ||
1.一种鉴别泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记，其特征在于：所述标记序列为：
泰国多鳞鱚隐存种的分子标记序列为：
CCCATGCAGGTGCTTCCGTTGACCTCACTATCTTCTCCCTGCACTTAGCAGGGATTTCATCAATTCTAGGGGCAATCAACTTCATCACGACAATCATTAACATGAAACCTCCTGCAACTTCCCAATACCAAACCCCACTGTTTGTATGGTCCGTCTTAATTACGGCTGTTCTCCTCCTCCTTTCACTCCCCGTACTCGCAGCCGGAATCACCATGCTTCTCACAGATCGAAACCTGAACACCACC；
多鳞鱚的分子标记序列为：
CCCATGCAGGAGCTTCCGTTGACCTTACTATCTTCTCCCTGCACTTAGCAGGGATTTCATCAATTTTAGGAGCAATCAACTTTATCACAACAATCATTAACATGAAACCTCCTGCAACTTCCCAGTACCAAACCCCACTGTTTGTATGGTCCGTCTTAATTACAGCTGTTCTCCTCCTCCTTTCACTGCCTGTACTCGCAGCCGGAATCACCATGCTTCTCACAGATCGAAATCTGAACACCACC。
2.一种鉴别泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记引物，其特征在于：所述引物序列为：
L6312：5’-TCCTCTAGCAGGCAACTTAG-3’；
H6558：5’-CCTCCTGCAGGGTCAAAGAA-3’。
3.一种鉴别泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记方法，其特征在于：所述鉴别方法的具体步骤为：提取泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的DNA，以两种鱼的DNA为模板，以引物进行PCR扩增，对扩增结果进行纯化、测序，比对测序结果。
4.根据权利要求3所述的一种鉴别泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系组成为：超纯水17.5ul、10×buffer 2.5ul、dNTPs 2ul、rTaq 0.15ul、模板1ul、Primer各1ul。
5.根据权利要求3所述的一种鉴别泰国多鳞鱚隐存种与多鳞鱚的分子标记方法，其特征在于：所述PCR扩增程序为：94℃预变性5min，然后94℃变性45s，50℃退火45s，72℃延伸45s，共进行35个循环，72℃最后延伸10min，4℃保存∞。
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