[发明专利]一种利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法

说明书

本发明公开了一种利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法，包括以下步骤：将八宝景天无菌苗茎段切成1cm长带1个节点的段，接种在初代培养培养基上，接种后在培养室中培养，制备得到愈伤组织或者芽；将初代培养中由茎段产生的愈伤组织分别接种在愈伤分化培养基上，得到丛芽；然后将芽或者丛芽接种在增殖培养基进行培养；其中，增殖培养基的配方同初代培养培养基；将丛芽增殖所得到的芽分成单芽接种在生根壮苗培养基上进行培养，得到组培苗；将组培苗移到室温下，练苗3d，旋松瓶口继续练苗4d后，洗净组培苗根部琼脂，晾干表面水分后移栽于培养基质中进行培养。本发明解决了叶片出芽率低及生根率低的问题。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，涉及一种利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法。

背景技术

八宝景天(Sedum spectabile Boreau)是景天科(Crassulaceae)的一种观赏植物，是长药八宝(Hylotelephium spectabile)的一个变种。其中粉色品种花开时似一片粉烟，群体效果极佳，而且耐干旱、耐低温、耐荫、耐贫瘠，植株强健，管理粗放，近年来受到越来越多的关注，其在园林布景中的推广面积也越来越大。此外，八宝景天对Hg、Co轻度污染土壤的修复有一定的应用前景，有希望用于Hg和Co污染土壤的绿化。同时，八宝景天叶片的乙醇提取物有温和的抗菌活性，其花的提取物有一定的抗氧化活性。八宝景天也是兼性景天科酸代谢(CAM)植物，是进行生理研究的良好材料。分蘖繁殖与扦插繁殖两种方式虽然是目前生产上常用的，但其繁殖系数低，很难满足越来越大的市场需求。利用组织培养繁殖，不仅繁殖系数高，而且不受季节限制。此外，在西南地区由于催花会使植株产生一定量的变异，故也需要用组织培养的方式繁殖与保存种质。

关于八宝景天组织培养的报道较少，张晓艳、程云清以八宝景天幼嫩叶片为外植体，通过诱导愈伤组织，继而分化得到丛芽(张晓艳,程云清.八宝景天的组织培养与快速繁殖.吉林师范大学学报(自然科学版).2:60-62.)，但其生根的效果不好；我们也曾经用叶片做外植体得到再生植株(Cuiqin Yang,Yaoguo Qin,Xin Sun,et al.Propagation ofSedum spectabile Boreau in Leaf Culture in Vitro.Not Bot Horti Agrobo,2012,40(1):107-112.)，但出芽数较低。关于八宝景天的组培繁殖体系还需进一步的完善以达到生产化的要求。

发明内容

针对现有技术中存在的叶片出芽率低及生根率低的问题，本发明提供了一种利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法。该方法是一种简便、高效的快繁体系，以满足越来越大的市场需求。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种利用八宝景天无菌苗茎段进行离体快繁的方法，包括以下步骤：

步骤1、茎段的获得与初代培养：

将八宝景天无菌苗茎段切成1cm长带1个节点的段，接种在初代培养培养基上，接种后在培养室中培养，制备得到愈伤组织或者芽；

步骤2、愈伤组织的分化：

将初代培养中由茎段产生的愈伤组织分别接种在愈伤分化培养基上，得到丛芽；

步骤3、增殖培养：

然后将步骤1得到的芽或者步骤2得到的丛芽接种在增殖培养基进行培养；其中，增殖培养基的配方同初代培养培养基；

步骤4、芽的生根壮苗：

将丛芽增殖所得到的芽分成单芽接种在生根壮苗培养基上进行培养，得到组培苗；

步骤5、练苗移栽：

将组培苗移到室温下，练苗3d，旋松瓶口继续练苗4d后，洗净组培苗根部琼脂，晾干表面水分后移栽于培养基质中进行培养。