[发明专利]壮药九层楼总黄酮提取方法

说明书

本发明提供一种壮药九层楼总黄酮提取方法，包括以下步骤：将九层楼药材粉碎后，加入有机醇，在高压脉冲电场下进行提取，过滤，滤渣用有机醇洗涤，合并滤液并减压浓缩，得浸膏；将浸膏溶解后，先加入无机碱溶液，调节溶液pH至碱性，静置过滤后，滤液再加入酸性水溶液调节溶液pH至酸性或中性，自然层析，将沉淀物干燥；将干燥后的产物溶解，经陶瓷超滤膜进行过滤，滤液浓缩干燥后经甲醇溶解，加入葡聚糖凝胶柱进行柱层析吸附，得到的黄色溶液浓缩干燥，即得九层楼总黄酮纯品。本发明的提取方法操作简单，反应时间短，溶剂用量少，总黄酮提取率高，得到的总黄酮活性高，且纯度大于96％。

技术领域

本发明属于中药分析技术领域，具体涉及一种壮药九层楼总黄酮提取方法。

背景技术

我国壮族主要集中于广西自治区，据该区有关部门调查，壮药共有709种。《壮族民间用药选编》收载常用壮药500多种。具有地方民族特色的壮药主要有：广西马兜铃、千斤拔、龙船花、闭鞘姜，阳桃、两面针、鸡蛋花、刺芋、金锦香、南蛇簕、薯莨、马鬃蛇、褐家鼠、蟒蛇等。

九层楼，别名鹿药、盘龙七、偏头七、螃蟹七、白窝儿七、狮子七，山糜子，为百合科鹿药属植物鹿药的根茎及根，有药用价值。常生于林下及山坡阴处。分布中国西南、西北、东北和华北等地。九层楼，性味“甘、苦、温，无毒”。具有补气益肾、祛风除湿、活血调经功能，用于治疗风湿骨痛，神经性头痛，乳腺炎，月经不调，痈疖肿毒，跌打损伤等。张东东等进行了《星点设计-响应面法优选鹿药总黄酮提取工艺》，提取工艺为：称取鹿药药材，置于圆底烧瓶中，加入70％乙醇，回流提取。滤液水浴蒸干，残渣用70％乙醇溶解，过滤。赵淑杰等进行了《高速逆流色谱分离与鉴定鹿药中黄酮类化合物》的研究，公开了鹿药的提取过程：将鹿药根茎加入90％乙醇进行超声波提取，提取液浓缩得到的浸膏过D101大孔吸附树脂吸附，洗脱部分再上硅胶柱进行梯度洗脱。刘霞等进行了《大孔吸附树脂纯化鹿药总皂苷和总黄酮的研究》，研究公开了鹿药的总皂苷和总黄酮的提取过程：将鹿药根及根茎，用80％乙醇加热回流提取，滤液旋转蒸发浓缩得浸膏，将浸膏加入水中，用石油醚脱脂，正丁醇萃取，浓缩正丁醇相，用乙醇溶解。现有的提取方法，存在提取时间长、消耗溶剂多、提取效率低等不足。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种壮药九层楼总黄酮提取方法，包括原料预处理、高压脉冲电场提取、层析、膜过滤和柱层析吸附步骤，整个方法操作简单，反应时间短，溶剂用量少，总黄酮提取率高，得到的总黄酮活性高，且纯度大于96％。

本发明通过以下技术方案实现：

壮药九层楼总黄酮提取方法，包括以下步骤：

(1)原料预处理：将九层楼药材洗净，烘干，粉碎，得九层楼药材粉末；

(2)高压脉冲电场提取：向九层楼药材粉末中加入有机醇，浸泡；然后进行高压脉冲电场提取，过滤，滤渣用有机醇洗涤，合并滤液并减压浓缩，得浸膏；

(3)层析：将浸膏用有机醇溶解，加入无机碱溶液，调节溶液pH至碱性，静置，过滤，滤液用酸性水溶液调节溶液pH至酸性或中性，然后将溶液放入层析罐中自然层析，过滤，将沉淀物干燥，得九层楼总黄酮粗品I；

(4)膜过滤：将九层楼总黄酮粗品I用有机醇溶解，然后经陶瓷超滤膜进行过滤，滤液浓缩干燥，得九层楼总黄酮粗品II；

(5)柱层析吸附：将九层楼总黄酮粗品II用甲醇溶解，加入以葡聚糖凝胶LX-20为吸附剂的层析柱进行吸附，用甲醇洗脱液洗脱，收集黄色色带并浓缩干燥，得纯度大于96％的九层楼总黄酮纯品。

作为本发明的进一步说明，步骤(1)所述九层楼药材粉末为过60-120目筛。

作为本发明的进一步说明，步骤(2)所述九层楼药材粉末与有机醇的料液比为1:30-45，所述有机醇为C₁-C₄的一元醇。