[发明专利]一种烟曲霉菌液体培养基

说明书

本发明属于医药技术领域，提供了一种烟曲霉菌的液体培养基，即在烟曲霉NRRL2436液体培养基中添加不溶性强碱弱酸盐粉末，减少了烟曲霉液体培养过程中菌球的形成，使菌体以细小菌球或分散菌丝形式存在，减少了大小不一菌球的形成，实现了烟曲霉液体培养的均质化，同时显著的提高了烟曲霉素发酵效价。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种烟曲霉菌液体培养基。

背景技术

烟曲霉素是烟曲霉产生的抗生素，由三个异戊烯聚合而成的，属于萜烯和甾体化合物有关的次级代谢产物。烟曲霉素对微孢子虫病和阿米巴虫病有特殊疗效，此外，烟曲霉素已被证实能抑制内皮细胞增生和血管生成，从而具有抗癌活性。烟曲霉素的许多衍生类似物也能抑制血管增生和甲硫氨酰氨肽酶活性，有些衍生物(XMT-1107、TNP-470、CKD-732、CKD-1061、PPI-2458)在抗癌和减肥方面已经进入临床研究。因此，烟曲霉素作为医药中间体的地位也越来越重要。

烟曲霉素可以通过烟曲霉液体发酵培养的方法获得(US764710)。但是在烟曲霉液体发酵培养过程中，烟曲霉极易成球且挂壁生长(Wen Yang et al.,Effects ofcarboxymethylcel lulose and carboxypolymethylene on morphology of Aspergillusfumigates NRRL 2346and Fumagillin Production,2003,24-27)。菌体若形成细小均一的菌球，可以减少粘度，提高氧传质，但是若菌球过大且不均一，往往导致培养液均质性差、重现性低。同时，菌球过大也会使菌球内部营养缺乏，从而减少代谢产率。因此，在烟曲霉素液体发酵研究和生产中，控制烟曲霉菌体成为分散均质的菌丝体或均质的细小菌球是烟曲霉素高产稳产的关键。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种烟曲霉菌的液体培养基，克服了烟曲霉菌在液体培养过程中形成大小不一的菌丝球和严重挂壁现象，从而使实验研究和生产具有较好的重现性和稳定性。

本发明技术方案包括以下步骤：

一种烟曲霉菌的液体培养基，烟曲霉菌液体培养基中添加不溶性强碱弱酸盐粉末。

所述的液体培养基中，所述不溶性强碱弱酸盐粉末选自磷酸钙、磷酸镁、碳酸镁、碳酸钡、碳酸钙中的一种。优选为磷酸钙。

所述的液体培养基中，所述不溶性强碱弱酸盐粉末的添加量为5-30g/L，优选的是10-20g/L，最优选的是15g/L。

优选地，所述的液体培养基，还包含：葡萄糖或淀粉或糊精30-45g/L。

优选地，所述的液体培养基，还包含：玉米浆15-25g/L。

优选地，所述的液体培养基，pH调至7.5以下。

优选地，所述液体培养基还含有谷氨酸5g/L。

培养过程中，斜面培养基可以是现有技术斜面培养基，也可以为下述培养基：

(1)(g/L)：葡萄糖20，酵母浸膏20，胰蛋白胨1，琼脂粉20，pH6.7。

(2)(g/L)：甘油7.5，蔗糖9.4，七水硫酸镁0.05，磷酸氢二钾0.06，氯化钠4，胰蛋白胨5，琼脂粉20，pH6.7。

(3)(g/L)：甘油7.5，蔗糖9.4，七水硫酸镁0.05，磷酸氢二钾0.06，氯化钠4，胰蛋白胨5，琼脂粉20，pH6.7。

(4)(g/L)：甘油7.5，蔗糖9.4，七水硫酸镁0.05，磷酸氢二钾0.06，氯化钠4，胰蛋白胨5，琼脂粉20，pH6.7。

本发明技术方案菌种为：