[发明专利]一种用稀碱溶液提取-固相萃取柱纯化原儿茶酸的方法

说明书

本发明涉及一种用稀碱溶液提取‑固相萃取柱纯化原儿茶酸的方法，包括以下步骤：(1)将四季青叶原料粉碎，用稀碱溶液浸泡后加热提取，浓缩提取液并调节pH值为酸性，用乙酸乙酯萃取后收集有机相并浓缩，再用碱溶液萃取，收集水相并调节pH值为酸性，再用乙醚萃取后收集有机相并浓缩，得固态提取物；(2)用甲醇水溶液溶解步骤(1)所得提取物，上样于固相萃取柱进行纯化，重结晶，即得原儿茶酸。本发明提供的方法采用稀碱溶液提取，能耗较低，不同pH条件下萃取，除杂效果好；所用有机溶剂回收后可重复利用；固相萃取柱脱色除杂效果好，直接收集流出液，工艺简单；所得产品纯度﹥98％，收率较高，方法简单易于工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种用稀碱溶液提取-固相萃取柱纯化原儿茶酸的工艺方法，采用稀碱溶液提取，有机溶剂萃取和固相萃取柱分离等工序制备原儿茶酸的工艺方法。

背景技术

原儿茶酸属酚酸类化合物，用稀碱溶液提取使原儿茶酸成盐，增加其水溶性从而提高转移率；固相萃取(Solid Phase Extraction，简称SPE)基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程，也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程。填料保留机理分为保留目标化合物和保留杂质，本发明利用HLB填料保留杂质机理，即对原儿茶酸的吸附性差，对杂质的吸附性强。

原儿茶酸(3，4-二羟基苯甲酸)分子式：C₇H₆O₄，分子量：154.12，分子结构如下：

物理性质：白色至褐色结晶性粉末，在空气中变色。密度1.54g/cm3。熔点约200℃(分解)。溶于乙醇、乙醚和乙酸乙酯。

研究表明原儿茶酸有抗菌作用，体外试验时对绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、产碱杆菌及枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑菌作用。在医药领域，原儿茶酸具有祛痰、平喘作用，临床用于治疗慢性气管炎。除此之外，动物实验表明原儿茶酸具有良好的抗癌症、抗氧化、抗病毒、抗细菌、抗炎症等多种药理作用。

目前生产原儿茶酸的方法主要有化学合成法和中药提取法。化学合成法虽然生产成本低产物纯度高，但是化学合成条件较为苛刻，一般需要在强酸(强碱)和高温的条件下进行反应，对设备的耐腐蚀性要求高。例如一种抗病毒化合物原儿茶酸的合成工艺，专利号ZL201410271618.1。中药提取法工艺条件较为温和，例如一种从滇桂艾纳香中提取原儿茶酸的工艺方法，专利号ZL201410271618.1，此专利利用TLC制备提纯，不适于工业化大生产。本发明一种用稀碱溶液提取-固相萃取柱纯化原儿茶酸的工艺方法，工艺条件温和，方法简单易于工业化生产。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种用稀碱溶液提取-固相萃取柱纯化原儿茶酸的工艺方法，该法纯化出的产品含量高，且便于工业化操作。

具体而言，本发明提供了一种用稀碱溶液提取-固相萃取柱纯化原儿茶酸的方法，包括以下步骤：

(1)将四季青叶原料粉碎，用稀碱溶液浸泡后加热提取，浓缩提取液并调节pH值为酸性，用乙酸乙酯萃取后收集有机相并浓缩，再用碱溶液萃取，收集水相并调节pH值为酸性，再用乙醚萃取后收集有机相并浓缩，得固态提取物；

(2)用甲醇水溶液溶解步骤(1)所得提取物，上样于固相萃取柱进行纯化，重结晶，即得原儿茶酸。

其中，本发明优选所述浸泡使用的稀碱溶液为浓度0.05％～0.2％的NaHCO₃水溶液，更优选为浓度0.08％～0.1％的NaHCO₃水溶液。浸泡后，所述加热提取的温度优选为90～95℃。

本发明提供的方法需要两次调节pH值为酸性，所述调节pH值均优选调节至pH值1.5～2.5。