[发明专利]一种精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种精浆中性α‑葡糖苷酶检测试剂盒及其应用，该试剂盒包括R1试剂、R2试剂和非定值质控品；所述R1试剂为包含SDS的磷酸盐缓冲液；所述的R2试剂为包含尿素、水杨酸钠和PNPG的磷酸盐缓冲液；所述非定值质控品为精浆冻干粉。本发明试剂盒与全自动生化分析仪配套使用检测精浆中性α‑葡糖苷酶，试剂盒组分简单，没有终止液，生产和使用都相对简单；在检测精浆中性α‑葡糖苷酶时，反应时间约为5min，需要试剂量和样本量少，线性范围宽，结果的准确度和精密度高，同时可与精浆生化的其他项目联检。本发明试剂盒适用于临床上大批量样本的检测；可以通过反应曲线的变化监测整个反应过程。

技术领域

本发明涉及第二类体外诊断试剂，具体涉及一种精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒及其应用。

背景技术

附睾是精子成熟的重要器官，精浆中中性α-葡糖苷酶来源于附睾，是附睾的特异性酶和标志性酶。在附睾本身发生病变时，如附睾炎、附睾结节等，中性α-葡糖苷酶分泌减少，精浆中此酶的活力降低，因而测定精浆中性α-葡糖苷酶活性，对附睾炎和男性不育的早期诊断、治疗和随访具有重要意义。另外，附睾和输精管的梗阻会导致精浆中性α-葡糖苷酶活性明显下降，故检测精浆中性α-葡糖苷酶活性为准确、无创性诊断梗阻性无精子症提供了新的方法。

目前临床上采用的检测精浆中性α-葡糖苷酶的方法为改良Cooper法，文献报道的最短的反应时间约为25min，且所有操作均为手工法，因此不能满足临床大批量样本的检测，也不能对检测过程进行实时监测。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供一种精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒，该试剂盒组分简单，没有终止液，在检测精浆中性α-葡糖苷酶时，检测速度快，时间短，线性范围宽，结果的准确度和精密度高。

本发明还提供一种精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒的应用，该试剂盒可以在全自动生化分析仪上应用。

技术方案：为了实现上述目的，如本发明所述的一种精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂和非定值质控品；所述R1试剂为包含十二烷基硫酸钠(SDS)的磷酸盐缓冲液；所述的R2试剂为包含尿素、水杨酸钠和4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)的磷酸盐缓冲液；所述非定值质控品为精浆冻干粉。

其中，所述R1试剂中SDS的浓度为0.2％～0.5％g/mL。

所述R2试剂中PNPG的浓度为0.25％～0.6％g/mL、尿素浓度为0.1～1％g/ml、水杨酸钠浓度为0.8～3.0％g/ml。

作为优选，所述R1试剂和R2试剂的磷酸盐缓冲液均由0.1～0.4mol/L十二水合磷酸氢二钠和0.1～0.4mol/L二水合磷酸二氢钠互调pH值为6.0～7.0得到。

所述R1试剂和R2试剂中含有防腐剂青霉素、链霉素、青链霉素、硫酸庆大霉素和叠氮化钠中的一种或几种，含量为0.01～0.05％g/ml或者0.01～0.05％ml/ml。

进一步地，所述非定值质控品是由精浆冻干形成冻干粉，所述精浆含有防腐剂青霉素、链霉素、硫酸庆大霉素和叠氮化钠中的一种或几种。所述精浆已被检定HBsAg、HCV抗体、HIV1+2抗体和梅毒均为阴性。

其中，所述混合精浆中防腐剂浓度为0.01～0.05％g/ml或者0.01～0.05％ml/ml。

进一步地，所述精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒包括R1试剂、R2试剂、非定值质控品、说明书和内衬。

本发明所述的精浆中性α-葡糖苷酶检测试剂盒在全自动生化分析仪上应用。

其中，所述应用的检测步骤为