[发明专利]从红旱莲中提取总黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域的提取方法，具体涉及从红旱莲中提取总黄酮的方法。

背景技术

红旱莲，又名长柱金丝桃、湖南连翘、鸡心菜等，系藤黄科金丝桃属植物黄海棠(Hypericumascyron L.)的全草，具有凉血止血、平肝消肿、清热解毒之功效，可用于抗抑郁症、抗病毒、抗癌等。研究表明黄酮类化合物是红旱莲发挥药效的主要物质基础，该类物质具有抗衰老、抗抑郁、降血压、降血脂等多重生理作用。

现有技术对黄酮的提取，主要采用超声波法提取黄酮类物质，它的原理是超声的空化作用对细胞膜的破坏，有助于黄酮类化合物的释放与溶出，超声波使提取液不断震荡，促进溶质扩散，超声波产生的震荡作用还可促进细胞内物质的释放、扩散及溶解，有利于提高提取物的提取率。同时超声波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水浴作用。因此，超声波法相对于加热提取，缩短了提取时间，提高了有效成分的提出率，原料的利用率。有大量文献报道了从葛根、水芹、苦荞麦、银杏叶等中提取黄酮类物质。

现有的萃取方法，在挥发油方面的应用水蒸气蒸馏法和有机溶剂萃取法是目前应用最广泛的传统植物挥发油或有效成分的萃取方法，但操作时间长、能耗高、选择性差、有机溶剂易残留等缺陷使得这两种传统方法的工业化、规模化应用受到了很大限制。SFE技术以其无毒、残留量低、有效成分不易被破坏等优点备受称赞。但由于常用溶剂C0₂具有非极性和相对分子质量小的特点，使得对某些物质的溶解度较低、选择性不高而使提取效果并不理想，实际操作中往往要通过添加夹带剂来提高萃取率，萃取结束后，必须设法除去挥发油中的夹带剂，这势必导致工艺的复杂及易挥发成分的损失及氧化；另外由于水不溶于C0₂，因而超临界C0₂萃取过程常需将原料预先干燥，额外增加了成本，也使芳香性化合物油有所损失。此外，从植物中提取挥发油时，由于超临界C0₂不仅对挥发油而且对低极性的化合物如角质层中的蜡质、脂肪酸、有色物质及树脂也有相似的溶解性，提取过程中这些物质也会被提取出来，虽然采用复杂的体系也可以得到较纯的挥发油，但操作繁琐且对设备的要求也更为苛刻。

水的临界压力及临界温度分别为22.1MPa和374℃，在f>374℃，p>22.1MPa条件下，水的介电常数为5-15。在比374.2℃和22.1MPa稍微低一些的低温压下成液体状态的水称为“亚临界水”。将水加热至沸点以上，临界点以下，并控制系统压力使水保持为液态，这种状态的水被称为亚临界水，在文献中也有称它为超热水和高温水。通常条件下，水是极性化合物。在505kPa压力下，随温度升高(50-300℃)，其介电常数由70减小至1，也就是说其性质由强极性渐变为非极性，可将溶质按极性由高到低萃取出来。在温度和压力都较高的条件下、水的极性降低，可以萃取非极性化合物；温度和压力都较低的条件下，水的极性提高，可以萃取极性化合物。在实际萃取过程中，由于压力对介电常数的影响不如温度的影响大，所以主要通过调节温度来控制水的介电常数。由于是不使用酸、碱和催化剂的水在高热高压下的处理技术，因此亚临界水的提取方法被称之为“绿色的处理法”。此外，提取可以在数秒钟到数分钟的短时间内完成，故而具有可以进行连续处理的优点。亚临界水萃取技术在天然产物领域的活性成分的提取上很有前景。

发明内容

本发明的目的是提供从红旱莲中提取总黄酮的方法，具有工艺简单，适合生产，时间短等优点。

本发明通过以下技术方案实现。

从红旱莲中提取总黄酮的方法，具体包括如下步骤：

1)将红旱莲清洗干净，晾干，用粉碎机粉碎，过筛；

2)亚临界水萃取：将处理好的原料置于萃取釜中，加入相当于原料0.001重量份的羟乙基纤维素，将脱氧去离子水注入釜中，萃取温度150-250℃，压力8-10Mpa，萃取时间0.5-1.0h，对红旱莲进行萃取，萃取结束，泄压，萃取液流入收集罐中冷却至室温，得到萃取液；

3)纯化：将步骤2)得到的萃取液浓缩，通过大孔树脂进行柱层析，50％(v/v)的乙醇洗脱，得到洗脱液，浓缩，干燥，得到成品。

本发明步骤1)所述的过筛，优选过20-80目筛。

步骤2)所述的将脱氧去离子水注入釜中，优选将脱氧去离子水以小于10mL/min的流速注入釜中，料液比为1:2-3。

步骤3)所述的浓缩，优选温度控制≤50℃，真空控制在-0.08±0.01MPa，浓缩至0.95-1.05g/ml。