[发明专利]一种提高明月草侧芽成活率的方法

权利要求书

1.一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤：

侧芽培养：取幼嫩明月草幼嫩茎段流水冲洗并采用无菌处理后去除茎段水分，将每一个带侧芽的茎段切成0.8-1.5cm长，将切后的茎段放入MS培养基进行培养，保持培养基的PH值为5.5-6.5的范围内，将切后的茎段在培养基中先进行1-3天的暗培养，在此期间每天向培养基加入琼脂、蔗糖、维生素C，并保持培养基中的琼脂、蔗糖、维生素C的浓度分别在：4.5-6.5g/L、24-32g/L、15-21mg/L之间，温度为23-26℃，在通过强度为2000lx-3000lx的光照条件下培养22-30d；

增殖培养：将侧芽培养完成后的茎段放入培养基中，培养基中肌醇的浓度为86-110mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.05-0.15mg/L，培养时间为5-7d；

栽种：清洗茎段后置于空气中锻炼2-3天，移栽至大棚中，用薄膜覆盖以保湿保温，保持湿度在70％-80％之间、温度在23-26摄氏度之间，并进行50％-60％的遮阴，20d后移除薄膜，4-6个月后进行收割。

2.根据权利要求1所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，所述方法还包括：

黄酮提取：将明月草全株自然风干，研碎成粉末，加入温度为42-70℃的石油醚，分别按照粉末和石油醚质量比为1:2.5-4和1:5-7进行提取，每次提取的时间为1.5-2H，获得提取粉末；在提取粉末中加入提取溶液，并采用60℃-70℃的水浴回流并过滤，获得过滤后粉末；对过滤后粉末采用蒸馏水对提取物进行浸泡，分别用0.3mol/L的NaOH和0.3mol/L的HCl处理20-25分钟，并用蒸馏水清洗至PH为5.5-6.5之间；采用梯度乙醇进行洗脱，并别收集洗脱液进行合并浓缩。

3.根据权利要求2所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，梯度乙醇的浓度分别为：35％乙醇、55％乙醇、75％乙醇、95％乙醇和无水乙醇，分别获得各个浓度的乙醇洗脱液进行合并浓缩后，采用30％乙醇进行定容。

4.根据权利要求2所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，所述提取溶液分别为60％乙醇、60％甲醇和蒸馏水。

5.根据权利要求1所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，在采用梯度乙醇洗脱之前，加入聚酰胺粉并进行搅拌，并将粉末溶液加入聚酰胺粉的砂芯层析柱中，然后采用梯度乙醇进行洗脱。

6.根据权利要求1所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，所述MS培养基初基本培养基外还包括浓度为0.02-0.03mg/L的萘乙酸、浓度为0.02-0.03mg/L的苄氨基腺嘌呤。

7.根据权利要求1所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，清洗茎段后置于空气温度为20-22℃的空气中锻炼2-3天，并保持90％的空气湿度。

8.根据权利要求2所述的一种提高明月草侧芽成活率的方法,其特征在于，将合并浓缩后的洗脱液一起放置于循环回流装置中进行回流提取，60-70℃条件下，回流提取3-4次，每次30-40min。