[发明专利]定量检测血清中Asia1型口蹄疫病毒抗体的检测卡

权利要求书

1.一种定量检测血清中Asia1型口蹄疫病毒抗体的检测卡，包括检测卡外壳和装配在检测卡外壳内的试纸条，所述试纸条包括带压敏胶的塑料底板，在底板上依次粘贴样品垫、标记物垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述标记物垫由载体基层和标记物组成，标记物为载体基层上喷涂镧系荧光检测微球和镧系荧光质控微球形成的一层膜，其特征在于：所述硝酸纤维素膜上包被Asia 1型口蹄疫病毒重组抗原为检测线，包被兔抗鸡lgY抗体为质控线，标记物为标记有Asia 1型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的重组抗原的荧光检测微球和标记鸡lgY抗体的荧光质控微球。

2.根据权利要求1所述的定量检测血清中Asia1型口蹄疫病毒抗体的检测卡，其特征在于：所述Asia 1型口蹄疫病毒是Asia 1型口蹄疫病毒VP1抗原区表位抗原，其为表达的表位重组蛋白。

3.根据权利要求1所述的定量检测血清中Asia1型口蹄疫病毒抗体的检测卡，其特征在于：所述硝酸纤维素膜上质控线采用的兔抗鸡lgY抗体为兔抗鸡lgY的lgG。

4.一种制备权利要求2中所述Asia 1型口蹄疫病毒VP1重组抗原的方法，其特征在于：采用生物信息学技术对Asia 1型口蹄疫病毒不同谱系毒株VP1抗原基因进行比对分析，设计合成Asia 1型口蹄疫病毒特异性VP1抗原基因，并将其克隆入原核表达质粒构建Asia 1型口蹄疫病毒抗原VP1抗原基因重组表达质粒，然后将其转化大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）pLysS筛选重组表达菌，重组表达菌经IPTG诱导表达Asia 1型口蹄疫病毒VP1重组抗原，其经亲和层析纯化后获得纯化抗原为检测抗原。

5.一种制备权利要求2中所述Asia 1型口蹄疫病毒表位重组抗原的方法，其特征在于：采用生物信息学技术原理，应用计算机对Asia 1型口蹄疫病毒的结构蛋白VP1抗原基因进行比对分析，及抗原表位预测，筛选和设计Asia 1型口蹄疫病毒特异性的表位抗原肽序列，并进行人工化学合成抗原肽。

6.一种权利要求1或2或3或4所述检测卡的使用方法，其特征在于： 所述检测卡为定量层析检测卡，将含有Asia 1型口蹄疫病毒抗体的待测液滴入检测卡的加样孔中，层析15分钟，然后使用层析扫描仪对检测卡进行扫描，层析扫描仪将扫描所得数据无线传输给客户端，客户端根据扫描数据计算得出检测卡上质控线和检测线的荧光信号强度值，同时客户端从云平台获得被检测Asia 1型口蹄疫病毒抗体标准曲线，客户端根据标准曲线与质控线和检测线的荧光信号强度值的对照关系计算得出待测血清样本的Asia 1型口蹄疫病毒抗体的效价，判定结果。

7. 根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于：所述标准曲线是通过如下方式导入云平台的，首先制备一批检测卡，并配制对应的Asia 1口蹄疫病毒型抗体标准品，用检测卡层析标准品并用层析扫描仪检测，层析扫描仪将检测得到的数据处理传递给客户端，客户端计算得出标准品对应的检测线和质控线的荧光信号强度值，并根据此数据进行回归从而得到Asia 1型口蹄疫病毒抗体标准曲线，客户端将标准曲线传输至云平台储存。

8.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于：所述客户端计算得出的标准曲线形成一个文件，并对应生成条形码，客户端通过扫描条形码可以从云平台提取该标准曲线。