[发明专利]一种抗LAG-3的单克隆抗体及其制备方法和用途

说明书

本发明属于生物医药抗体领域，更具体地，本发明公开了一种抗LAG‑3的单克隆抗体及其制备方法和用途。本发明的抗LAG‑3单克隆抗体具有良好的生物活性，能够有效结合LAG‑3蛋白，并能够在蛋白水平和细胞水平有效封闭LAG‑3蛋白，并且有效增强免疫功能。该单克隆抗体能够单独或与其它抗肿瘤药物联合应用在肿瘤免疫治疗以及诊断和筛查中，还具有制备治疗肿瘤、抗自身免疫性疾病等药物的良好前景。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种抗LAG-3抗体及其制备方法和用途。

背景技术

淋巴细胞活化基因3或LAG-3(也称作CD223)系免疫球蛋白超基因家族之一员，并且在结构上以及遗传上与CD4有关。LAG-3并不在休眠的外周血淋巴细胞上表达，但在被活化的T细胞以及NK细胞上表达。LAG-3系由位于染色体12的短臂的远程部分、在CD4基因附近的一基因进行编码的膜蛋白，表明该LAG-3基因可能已经藉由基因重复而进化(Triebel etal.(1990)J.Exp.Med.171：1393-1405)。

在抗原特异性T细胞应答的体外研究中，加入抗LAG-3抗体导致T细胞增殖增加、活化抗原(如CD25)的更高表达、以及更高浓度的细胞因子(例如干扰素γ以及白介素4)，从而支持LAG-/MHC II类分子相互作用在下调CD4+T淋巴细胞的抗原依赖性刺激中的作用(Huard et al.(1994)Eur.J.Immunol.24：3216-3221)。已经证明LAG-3的胞质内区与名为LAP的蛋白进行相互作用，此蛋白被认为是与CD3/TCR活化途径的下调有关的信号转导分子(Iouzalen et al.(2001)Eur.J.Immunol.31：2885-2891)。此外，已显示CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在活化时表达LAG-3，并且针对LAG-3之抗体在体内以及体外均抑制由所诱导的Treg细胞所产生的阻抑，表明LAG-3有助于Treg细胞的阻抑活性(Huang，C.et al.(2004)Immunity 21：503-513)。另外，已显示LAG-3藉由调节性T细胞以T细胞依赖性以及非依赖性这两种机制对T细胞稳态进行负向调节(Workman，C.J.and Vignali，D.A.(2005)J.Immunol.174：688-695)。

此外，已显示可溶性人类LAG-3Ig扩大了在体外产生I型肿瘤特异性免疫(Casatiet al.(2006)Cancer Res.66：4450-4460)。在Triebel(2003)Trends Immunol.24：619-622中对LAG-3的功能活性进行了进一步综述。鉴于以上原因，用于调整LAG-3活性的药物特别是抗LAG-3单抗引起了极大的兴趣。然而，现有的抗LAG-3单克隆抗体还存在选择性不强、亲和力较低的缺陷。因此，研发新型抗LAG-3的单克隆抗体，并将其应用到治疗肿瘤、抗自身免疫性疾病等相关药物的制备，成为亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服目前抗LAG-3单克隆抗体存在选择性较弱，亲和力较低的缺陷，提供了一种新的供了该单克隆抗体的制备方法和应用，从而完成了本发明。

因此，本发明的第一个目的在于提供一种抗LAG-3的单克隆抗体。

本发明的第二个目的在于提供编码所述抗LAG-3单克隆抗体的核苷酸分子。

本发明的第三个目的在于提供包含所述核苷酸分子的表达载体。

本发明的第四个目的在于提供包含所述表达载体的宿主细胞。

本发明的第五个目的在于提供一种所述抗LAG-3单克隆抗体的制备方法。

本发明的第六个目的在于提供包含所述抗LAG-3单克隆抗体的组合物。

本发明的第七个目的在于提供所述抗LAG-3单克隆抗体在制备药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明采取了如下技术方案：