[发明专利]一种REGγ-20S蛋白酶体多肽抑制剂及其应用

权利要求书

1.NIP30在制备治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于，所述NIP30为由定位于人类染色体16q13，cDNA序列全长764bp编码的254个氨基酸组成的蛋白质。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为恶性肿瘤，包括转移性骨肿瘤。

3.如权利要求1中所述的NIP30在制备抑制细胞增殖、生长或调控细胞周期分布的药物中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述调控细胞周期分布是指所述NIP30用于提高G0/G1期细胞数，减少S期细胞数。

5.如权利要求1中所述的NIP30在制备REGγ底物降解的抑制剂中的应用。

6.如权利要求1～5之任一项所述的应用，其特征在于，所述NIP30为NIP30 S226 S227 S228 S230四个位点发生磷酸化的NIP30。

7.一种多肽，其特征在于，所述多肽包括：FITC-NIP30 WT和/或FITC-NIP30 4D；

所述FITC-NIP30 WT、FITC-NIP30 4D的序列分别为：

FITC-SSDSESSSDSEGTIN、FITC-SSDSEDDDDDEGTIN。

8.如权利要求7所述的多肽在制备治疗肿瘤的药物中的应用。

9.如权利要求7所述的多肽在制备抑制细胞增殖、生长或调控细胞周期分布的药物中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述调控细胞周期分布是指所述多肽用于提高G0/G1期细胞数，减少S期细胞数。

11.如权利要求7所述的多肽在制备REGγ底物降解的抑制剂中的应用。

12.一种融合蛋白片段，其特征在于，所述融合蛋白片段包括HA-NIP30 1-127、HA-NIP30 1-169、HA-NIP30 1-211、HA-NIP30 128-254、HA-NIP30 29-254、HA-NIP30 1-221、HA-NIP30 211-255、HA-NIP30 226-240、HA-NIP30 1-231、HA-NIP30 1-241、HA-NIP30 205-219中的一种或几种；通过以权利要求1中所述的NIP30为模板，设计引物，将NIP30片段构建在PSG5-HA tag质粒载体上，进而构建所述融合蛋白片段。

13.一种点突变蛋白，其特征在于，所述点突变蛋白包括NIP30 S221-224D、NIP30 S226-230D、NIP30 S221-230D中的一种或几种；通过以权利要求1中所述的NIP30为模板设计点突变引物，将特定区间内所有丝氨酸突变成模拟持续磷酸化的天冬氨酸，进而构建所述点突变蛋白。

14.一种融合蛋白，其特征在于，以权利要求1中所述的NIP30 S226到S230位点为中心，截取NIP30 221-235片段，并且对相应位点进行模拟持续磷酸化，与GFP蛋白组成所述融合蛋白；所述融合蛋白包括NIP30 WT-t和NIP30 4D-t。

15.如权利要求14所述的融合蛋白在制备REGγ底物降解的抑制剂中的应用。

16.一种稳转细胞株，其特征在于，所述细胞株包括293T wt(NIP30WT)、293T wt(NIP30 4D)、293T ko(NIP30WT)、293T ko(NIP304D)中的一种或几种；所述细胞株过表达NIP30及其点突变形式。

17.一种稳转细胞株，其特征在于，所述细胞株包括H1299 shN(NIP30WT)、H1299 shN(NIP30 4D)、H1299 shR(NIP30WT)、H1299 shR(NIP30 4D)中的一种或几种；所述细胞株过表达NIP30及其点突变形式。