[发明专利]一种腺苷含量的测定方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分析化学检测领域，尤其涉及一种腺苷含量的测定方法及其应用。

背景技术

轻络素(Fruitflow)为一种水溶性番茄浓缩物，是首个经过科学证明、可促进血流健康的天然解决方案。轻络素是一种突破性的抗血栓成分，可保持血小板凝集，从而有助于维持心血管系统健康。轻络素作为一种安全天然的配料，不会破坏受伤后必需的凝血过程；已发表的临床研究表明，轻络素可使97％的受试者在摄入后1.5小时内血小板凝集减小，功效可保持长达18小时；同时，在10项临床研究中发现，轻络素长期使用未见副作用、过敏反应或与其他药物不配伍的现象。

其中，腺苷、绿原酸和芦丁是轻络素的标志性功能成分，测定腺苷、绿原酸和芦丁的含量为含轻络素类制剂的质量标准提供依据。现有技术中已公开的的文献检测方法中，无法同时检测腺苷、绿原酸和芦丁三个成分；而且，文献对于样品的前处理方法，也无法达到同时提取腺苷、绿原酸和芦丁的作用。

因此，研发出一种腺苷含量的测定方法及其应用，用于解决现有技术中，无法同时准确检测软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的技术缺陷，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种腺苷含量的测定方法及其应用，用于解决现有技术中，无法同时准确检测软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的技术缺陷，有效提高了软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的检测效率和检测精确度。

本发明提供了一种腺苷含量的测定方法，所述测定方法为：

步骤一、溶解：待测样品与第一溶剂、第二溶剂混合后，超声得第一产物；

步骤二、提纯：所述第一产物离心后，弃去上层液；得第二产物；

步骤三、过滤：所述第二产物溶于第二溶剂中，有机相滤膜过滤得待测液；

步骤四、高效液相测定：待测液经高效液相色谱测定峰面积，与标准曲线对照，得待测物含量；

所述第一溶剂选自：石油醚、正己烷以及乙醚中的一种或多种，所述第二溶剂选自：体积浓度为20％的甲醇溶液、10％乙腈溶液以及10％乙醇溶液中的一种或多种。

优选地，步骤一中，第一溶剂和第二溶剂的体积比为1：(2～3)。

优选地，步骤二中，所述离心的转速为5000～8000r/min，所述离心的时间为1～3min。

优选地，步骤三中，所述第二产物与所述第二溶剂的体积比为1：(1～3)。

优选地，步骤三中，所述有机相滤膜的孔径为0.22μm。

优选地，步骤四中，高效液相色谱的测定中，流动相A为三氟乙酸溶液，流动相B为甲醇，采用梯度洗脱的方式进行测定。

优选地，步骤四中，高效液相色谱的测定中，流速为0.8～1.2ml/min，柱温为25～40℃。

优选地，步骤四中，高效液相色谱的测定中，检测波长为254nm。

本发明还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在绿原酸含量检测中的应用。

本发明还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在芦丁含量检测中的应用。

综上所述，本发明提供了一种腺苷含量的测定方法，所述测定方法为：步骤一、溶解：待测样品与第一溶剂、第二溶剂混合后，超声得第一产物；步骤二、提纯：所述第一产物离心后，弃去上层液，得第二产物；步骤三、过滤：所述第二产物溶于第二溶剂中，有机相滤膜过滤得待测液；步骤四、高效液相测定：待测液经高效液相色谱测定峰面积，与标准曲线对照，得待测物含量；所述第一溶剂选自：石油醚、正己烷以及乙醚中的一种或多种，所述第二溶剂选自：体积浓度为20％的甲醇溶液、10％乙腈溶液以及10％乙醇溶液中的一种或多种。本发明还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在绿原酸含量检测中的应用。本发明还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在芦丁含量检测中的应用。经实验测定可得，本发明提供的技术方案，可对待测样品中腺苷、绿原酸以及芦丁含量实现准确测定，进一步地，有效提高了软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的检测效率和检测精确度。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为腺苷的标准工作曲线；

图2为绿原酸的标准工作曲线；

图3为芦丁的标准工作曲线。

具体实施方式