[发明专利]一种修复苯嗪草酮污染水体的复合菌剂

权利要求书

1.一种修复苯嗪草酮污染水体的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂按照如下步骤制备而得：

1）将代尔夫特食酸菌种子液、铜绿假单细胞菌种子液、萎缩芽孢杆菌种子液以及黑色假单胞菌种子液按照1-2:2-3:2-3:3-5的体积比均匀，然后按照10%的接种量接种于无机盐驯化培养基中，在30℃、150rpm条件下振荡培养12h，得到复合菌液；所述代尔夫特食酸菌为ATCC 15668，所述铜绿假单细胞菌为ATCC 9027，所述萎缩芽孢杆菌为ATCC 9372，所述黑色假单胞菌为ATCC 19375；

2）将复合菌液放入两倍质量的载体中，在20℃搅拌30min，4℃静置24小时，在载体上逐渐形成菌群生物膜，滤干，即得；

所述载体的制备方法包括如下步骤：将聚苯醚用饱和食盐水浸泡2小时，然后排出液体，再用3wt%的氢氧化钠溶液浸泡6h，排出液体，然后用75%的乙醇冲洗至中性，然后添加壳聚糖、甘油以及水，充分混合均匀，置于60℃水浴锅中加热1h，真空抽滤后，加入浓度为2％的戊二醛溶液，交联1h，用水冲洗去掉多余的戊二醛，再加入浓度为0.5M的CaCl₂水溶液室温静置12小时，真空干燥，得到载体；所述聚苯醚、壳聚糖、甘油、水、戊二醛溶液以及CaCl₂水溶液的比例为：1-2kg:50-80g:5-7kg:2-3kg:5-7L:3-5L；

所述无机盐驯化培养基的制备方法包括如下步骤：

取(NH₄)SO₄ 2g，KH₂PO₄ 1g，Na₂HPO₄ 0.5g，MgSO₄ 0.2g，微量元素溶液1mL、苯嗪草酮200mg，加水定容至1000mL，调pH＝7.0，121℃灭菌20min，备用；

所述微量元素溶液的配制方法为：FeCl₃ 0.5g，FeSO₄ 0.5g，MnSO₄ 0.2g，ZnSO₄0.1g，CoCl₂0.1g，加水定容至1000mL，过滤除菌，即得；

所述代尔夫特食酸菌种子液、铜绿假单细胞菌种子液、萎缩芽孢杆菌种子液以及黑色假单胞菌种子液的浓度均为（1-5）×10⁷cfu/ml。