[发明专利]一种PRRSV感染相关的lncRNA及其siRNA在抑制病毒复制中的应用

说明书

本发明涉及一种siRNA及其在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。所述siRNA可以敲低lncRNA TCONS_00179042在PAM细胞中的表达，从而有效抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒；所述lncRNA TCONS_00179042能够促进PRRSV病毒复制，为研究抗PRRSV病毒复制的药物提供了新的靶标lncRNA TCONS_00179042；为进一步开发新的抗病毒策略奠定了基础，也为PRRSV感染后宿主抗病毒机制研究提供了候选lncRNA。

技术领域

本发明涉及非编码RNA技术领域，具体涉及一种PRRSV感染相关长链非编码RNA(lncRNA)及其干扰RNA(siRNA)在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害我国养猪业的重要疫病，其致病病毒PRRSV是一种单股正链RNA病毒，主要感染肺泡巨噬细胞(PAM)、成熟单核细胞、小胶质细胞等抗原递呈细胞，造成母猪流产、死胎、木乃伊胎以及仔猪的呼吸道疾病。猪繁殖与呼吸综合征是病毒病，在未感染前可以注射弱毒疫苗或灭活疫苗进行预防，但是现有的疫苗的保护性免疫效果有限，对异源毒株的保护效果差，疫苗免疫不能消除持续带毒现象，弱毒疫苗免疫群体内流行毒株与疫苗毒株的基因重组现象比较普遍，为变异株的产生提供了条件。因此，针对PRRSV流行的复杂局面，需要发现新的抗病毒免疫或治疗策略，解决目前PRRS防控中存在的困难。PRRSV感染相关的长链非编码RNA(lncRNA)在病毒感染致病过程中发挥着重要的作用，lncRNA分子对病毒的复制可能有促进或抑制作用，对其结构与功能进行研究，将有可能发现新的抗病毒方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种siRNA及其在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。

本发明提供了一种lncRNATCONS_00179042的siRNA，其特征在于，所述siRNA的核苷酸序列如Seq ID No.1所示。

本发明还提供了所述的siRNA在敲低PAM细胞中lncRNA TCONS_00179042表达中的应用。

优选的，所述siRNA对lncRNATCONS_00179042的敲低效率为45～55％。

本发明还提供了所述的siRNA在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。

本发明还提供了所述的lncRNATCONS_00179042作为靶点在开发治疗和预防PRRSV的药物和疫苗中的应用。

本发明的有益效果：本发明提供了一种lncRNA TCONS_00179042的siRNA，所述siRNA可以敲低lncRNATCONS_00179042在PAM细胞中的表达，从而有效抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒；所述lncRNATCONS_00179042能够促进PRRSV病毒复制，本发明提供的siRNA能够敲低lncRNA TCONS_00179042的表达，为研究抗PRRSV病毒复制的药物提供了新的靶标lncRNATCONS_00179042；为进一步开发新的抗病毒策略奠定了基础，也为PRRSV感染后宿主抗病毒机制研究提供了候选lncRNA。

附图说明

图1为PAM细胞中siNC和si TCONS_00179042干扰小RNA对si TCONS_00179042的干扰效率示意图；

图2为PAM细胞接种VR2332毒株24小时后实时荧光定量PCR测定lncRNATCONS_00179042表达量结果示意图；

图3为PAM细胞中siNC和si TCONS_00179042干扰小RNA，对PRRSV的复制抑制作用示意图；

图4为lncRNATCONS_00179042琼脂糖凝胶电泳结果图。

具体实施方式