[发明专利]HPLC法分离测定瑞他莫林及其相关物质的方法

权利要求书

1.HPLC法分离测定瑞他莫林及其相关物质的方法，其特征在于，所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测；所述相关物质为SM₁、粗品Z和中间体Z₁-Z₄的一种或多种，具体结构式如下所示：

所述流动相A为pH值为10.0±0.1、0.1mol/L的乙酸铵溶液，所述流动相B为乙腈和甲醇；所述乙酸铵溶液与所述乙腈和所述甲醇的体积比为300：210：490；所述检测器的检测波长为210nm±2nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱填料的颗粒粒径为3-5μm；流动相的流速为0.5-1.5ml/min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的柱长为150-250mm；柱温为25-45℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述相关物质为SM₁、粗品Z和中间体Z₁-Z₄，具体包括以下步骤：

1)配制空白溶液：取稀释剂作为空白溶液；

2)配制供试样品溶液：取供试样品溶于乙腈的水溶液，得样品溶液；

3)配制对照品溶液：取瑞他莫林对照品、SM₁、Z、Z1-Z4对照品，用稀释剂溶解稀释制成对照品溶液；

4)分别取步骤1)所述空白溶液、步骤2)所述供试样品和步骤3)所述对照品溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，确定瑞他莫林及相关物质的保留时间，按外标法以峰面积计算供试样品溶液中瑞他莫林及相关物质的含量；

所述稀释剂为浓度为0.01mol/L-0.5mol/L的乙酸铵溶液与乙腈的混合物；所述乙酸铵溶液与乙腈的体积比为50:50。