[发明专利]分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的制备与应用有效
| 申请号： | 201711066160.6 | 申请日： | 2017-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN108126190B | 公开（公告）日： | 2021-01-26 |
| 发明（设计）人： | 郭述良;杜丽娟;刘平;邬亭亭;姚义勇;罗永艾;徐莉;刘心竹;杨婷;甘易玲;敖知 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学附属第一医院 |
| 主分类号： | A61K38/51 | 分类号： | A61K38/51;C12N9/88;C12N15/70;A61P31/04 |
| 代理公司： | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人： | 吴兴伟 |
| 地址： | 400000 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分枝杆菌 噬菌体 裂解 lysin guo1 制备 应用 | ||
1.分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1、含有Lysin-Guo1表达元件的载体或含有Lysin-Guo1表达元件的表达盒或含有Lysin-Guo1表达元件的宿主细胞在制备抑菌剂中的应用，其特征在于，Lysin-Guo1的氨基酸序列为SEQ ID NO .1所示。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO .2所示。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述抑菌剂的抑菌谱为：结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。
4. 如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的制备方法包括如下步骤：分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的编码基因克隆至T/A克隆载体上，经验证为阳性的质粒进行酶切，回收分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的编码基因，与相同酶切后的表达载体骨架连接，验证为阳性的重组表达载体pET-Lysin-Guo1经液体培养基培养，诱导表达，收集菌液，提取，纯化；分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的氨基酸序列为SEQ ID NO .1所示。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的T/A克隆载体为pMD20-T。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin-Guo1的编码基因的T/A克隆的引物1的核苷酸序列为SEQ ID NO .3所示，引物1的5’端设计有NdeI内切酶的识别位点；引物2的核苷酸序列为SEQ ID NO .4所示，引物2的5’端设计有XhoI内切酶的识别位点。
7.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的酶切采用Nde I和Xho I双酶切。
8.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的表达载体骨架为pET28a。
9.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的纯化采用亲和层析法，收集的蛋白质进行复性。
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