[发明专利]一种胶原/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶原/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球的制备方法。

背景技术

羟基磷灰石因具有良好的生物相容性和骨传导性，无毒，无刺激性，且成分接近人体硬组织的无机相而成为一种研究非常广泛的无机非金属生物材料。然而，HA材料的降解速度慢、脆性大、力学性能差和成型困难等缺点又大大限制了其在生物医学领域中的应用。因此，国内外的研究人员常利用一些天然或合成高分子化合物，如胶原、明胶、壳聚糖、聚乳酸和聚乙烯醇等与HA复合，以期能够改善其相关性能。其中，胶原和壳聚糖是研究非常广泛的两种天然高分子。胶原是天然骨的主要有机成分，具有良好的生物相容性，且能够为成骨细胞的附着提供支架作用。壳聚糖作为一种天然的生物高分子，具有生物相容性和可降解性，无细胞毒性，且成球型性较好。目前，对于胶原/HA和壳聚糖/HA复合材料作为骨组织工程材料的报道很多，但是却很少有关于胶原/壳聚糖/HA三组分复合材料的文献报道，而对于胶原/壳聚糖/HA复合微球的研究则更少。有研究表明，形状不规整的颗粒植入体内时，会引起不良的反应。相比较而言，形状规则的微球材料则因具有粒径小、比表面积大、流动性好等独特的优点，以及良好的药物缓释和骨修复效果而表现出比其他形式的材料更诱人的应用前景。

发明内容

本发明提出一种胶原/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球的制备方法，

一种胶原/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球的制备方法，包括以下步骤：

（1）取猪皮I型胶原购于四川铭让生物科技有限公司；壳聚糖粉末，脱乙酰度75％～85％)购于美国Sigma-Aldrich公司；生物级纳米羟基磷灰石粉末购于南京埃普瑞纳米材料有限公司；油相为金龙鱼大豆油(精炼一级)；除脱水山梨醇单油酸酯(Span80)为化学纯之外，戊二醛、冰醋酸、氢氧化钠均为国产分析纯，使用前未做任何处理；

（2）称取胶原和壳聚糖于烧杯中，加入5mL醋酸溶液，搅拌使其溶解后得到透明、粘稠的溶液；

（3）将该溶液加入到大豆油中，并在30-45摄氏度恒温水浴锅中平稳搅拌，使之在磁力搅拌作用下形成均匀的油包水型液体；

（4）向所得乳液体系中加入戊二醛溶液(25％)进行交联，使乳液中的小液滴固化、成型，交联2h后，向乳液体系中加入Na0H溶液，将溶液pH值调节为10，使产物充分沉淀；

（5）将所得产物离心后用丙酮、去离子水反复洗涤，之后置于室温下自然晾干，最终得到胶原/壳聚糖复合微球；

（6）将一定量的羟基磷灰石粉末加入到胶原和壳聚糖的混合溶液中，常温下搅拌分散约1h后，将其加入到含有表面活性剂的油相中；

（7）并在37摄氏度恒温水浴锅中平稳搅拌，使之在磁力搅拌作用下形成均匀的油包水型液体；

（8）向所得乳液体系中加入戊二醛溶液进行交联，使乳液中的小液滴固化、成型，交联2h后，向乳液体系中加入Na0H溶液，将溶液pH值调节为10，使产物充分沉淀；

（9）将所得产物离心后用丙酮、去离子水反复洗涤，之后置于室温下自然晾干，最终得到胶原／壳聚糖／HA复合微球。

优选地，所述步骤（3）的加热温度为45摄氏度。

本发明所述方法制备的胶原/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球，球形规则、分散性高且粒径分布均匀。

具体实施方式

实施例1。

一种胶原/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球的制备方法，包括以下步骤：

（1）取猪皮I型胶原购于四川铭让生物科技有限公司；壳聚糖粉末，脱乙酰度75％～85％)购于美国Sigma-Aldrich公司；生物级纳米羟基磷灰石粉末购于南京埃普瑞纳米材料有限公司；油相为金龙鱼大豆油(精炼一级)；除脱水山梨醇单油酸酯(Span80)为化学纯之外，戊二醛、冰醋酸、氢氧化钠均为国产分析纯，使用前未做任何处理；

（2）称取胶原和壳聚糖于烧杯中，加入5mL醋酸溶液，搅拌使其溶解后得到透明、粘稠的溶液；

（3）将该溶液加入到大豆油中，并在45摄氏度恒温水浴锅中平稳搅拌，使之在磁力搅拌作用下形成均匀的油包水型液体；

（4）向所得乳液体系中加入戊二醛溶液(25％)进行交联，使乳液中的小液滴固化、成型，交联2h后，向乳液体系中加入Na0H溶液，将溶液pH值调节为10，使产物充分沉淀；

（5）将所得产物离心后用丙酮、去离子水反复洗涤，之后置于室温下自然晾干，最终得到胶原/壳聚糖复合微球；

（6）将一定量的羟基磷灰石粉末加入到胶原和壳聚糖的混合溶液中，常温下搅拌分散约1h后，将其加入到含有表面活性剂的油相中；