[发明专利]用于细胞重编程的方法和组合物

权利要求书

1.一种将细胞从第一细胞类型重编程成第二细胞类型的方法，其包括使所述细胞接触：

a)与基因的靶位点杂交的指导RNA，其中所述基因编码有助于所述细胞的细胞类型特异性功能的蛋白质；以及

b)Cas核酸酶或编码所述Cas核酸酶的多核苷酸，其中所述Cas核酸酶在所述靶位点处切割所述基因的链，

其中切割所述链改变所述基因的表达，使得所述细胞不能再执行所述细胞类型特异性功能，从而将所述细胞重编程成所述第二细胞类型。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述基因包含在所述第一细胞类型中导致不利影响的突变，其中所述不利影响选自衰老、凋亡、缺乏分化和异常细胞增殖。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述基因编码转录因子。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞为胰腺、心脏、脑、眼、肠、结肠、肌肉、神经系统、前列腺或乳腺的细胞。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞为有丝分裂后的细胞。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞为眼细胞。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述眼细胞为视网膜细胞。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述视网膜细胞为视杆。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述细胞类型特异性功能为夜间视觉或颜色视觉。

10.如权利要求6所述的方法，其中所述基因选自NRL、NR2E3、GNAT1、RORβ、OTX2、CRX和THRB。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述第一细胞类型为视杆并且所述第二细胞类型为视锥。

12.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞为癌细胞。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述细胞类型特异性功能选自异常细胞增殖、转移和肿瘤血管化。

14.如权利要求12所述的方法，其中所述第一细胞类型为结肠癌细胞，并且所述第二细胞类型为良性肠细胞或良性结肠细胞。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述基因选自APC、MYH1、MYH2、MYH3、MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、EPCAM、POLE1、POLD1、NTHL1、BMPR1A、SMAD4、PTEN和STK11。

16.如权利要求12所述的方法，其中所述第一细胞类型为恶性B细胞，并且所述第二细胞类型为良性巨噬细胞。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述基因选自C-MYC、CCND1、BCL2、BCL6、TP53、CDKN2A和CD19。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞为神经元。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述第一细胞类型产生选自淀粉样蛋白β、tau蛋白及其组合的至少一种蛋白质，并且所述第二细胞类型不产生所述蛋白质，或者相比于所述第一细胞类型产生较少的所述蛋白质。

20.如权利要求18所述的方法，其中所述第一细胞类型为神经元，并且所述第二细胞类型为神经胶质细胞。

21.如权利要求18所述的方法，其中所述基因选自APP和MAPT。