[发明专利]一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法

权利要求书

1.一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，该方法步骤如下：

(1)取葛根中低淀粉含量部分洗净，切成薄片，沥干表面水后置于灭菌锅中于120℃-125℃干蒸60-120min；

(2)将干蒸后的葛根片干燥至含水量为15％-20％，然后粉碎为绿豆大小的颗粒；

(3)于葛根粒中加入为葛根粒重量1％-3％的金花菌粉，混匀，密封，于25-35℃发酵10-15天；

(4)于发酵后的葛根粒加入至少为葛根粒重量3倍的1％质量浓度的柠檬酸水溶液浸泡4-8小时；

(5)将浸泡后的混合物置于提取罐中，于80-90℃提取4-6小时，过滤，滤液备用；滤渣中加入至少为滤渣重量3倍的1％质量浓度的柠檬酸水溶液，于80-90℃提取2-3小时，过滤，滤液备用；滤渣再重复提取1次；合并3次滤液，浓缩至未发酵葛根粒重量的1/3，即得葛根活性物质；

其中，上述金花菌粉是以葛根作为培养基质，按1kg培养基质加15-20mL金花菌孢子接种液的比例加入金花菌孢子接种液，于26-30℃发酵5-7d，再于30-32℃发酵3-5天，将发酵产物拌匀，干燥至含水量为5-8％，过80-100目筛，即得；其中，上述金花菌孢子接种液是以保藏号CCTCC NO：M 2015379的金花菌冠突散囊菌(EurotiumCristatum)LS1菌株作为发酵菌株制得的发酵滤液。

2.如权利要求1所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述葛根中低淀粉含量部分为葛根地上部分的基部膨大茎、葛根皮和葛根块茎的两端切块。

3.如权利要求1所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的干燥温度为60℃-70℃。

4.如权利要求1所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述金花菌粉制作中以葛根作为培养基质是指：取葛根洗净、粉碎，加入为葛根重量25-35％的无菌水，充分混匀成培养基质，于80-100℃干燥1-1.5h，冷却至40-50℃，再于80-100℃干燥1h。

5.如权利要求1所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述金花菌孢子接种液的浓度为4.5×10⁸-5×10⁹个/mL。

6.如权利要求5所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述金花菌孢子接种液是将金花菌LS1菌株在无菌条件下接种于含改良PDA培养液的培养瓶中，接种量为10％，于28-30℃培养6-8d，再以160-200rpm/min振荡培养瓶18-22min，过滤除去菌丝，即得。

7.如权利要求6所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述改良PDA培养液是取马铃薯300g,加水煮20min，过滤，于滤液中加入葛根40g后煮沸，5min后过滤，所得滤液加入葡萄糖20g后补水至1000mL制得。

8.如权利要求1所述的一种从葛根中提取葛根活性物质的生物制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中的浓缩温度为100-120℃。

9.权利要求1所述方法制得的葛根活性物质在葛根口服液或葛根冲泡饮料制备中的应用。