[发明专利]大豆灰斑病菌的特异性分子检测引物及其应用有效
申请号: | 201711076443.9 | 申请日: | 2017-11-06 |
公开(公告)号: | CN107674923B | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
发明(设计)人: | 宋爽;张俊华;陈宇飞 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 哈尔滨市哈科专利事务所有限责任公司 23101 | 代理人: | 吴振刚 |
地址: | 150030 黑龙江省哈尔*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大豆 病菌 特异性 分子 检测 引物 及其 应用 | ||
1.一种大豆灰斑病的PCR检测方法,以待检测样本DNA为模板,进行PCR扩增,PCR反应体系为:2.5μL 10×PCR缓冲液,浓度25mM 1.5μL Mg2+,浓度10mM 0.5μL dNTP,2.5U Taq DNA聚合酶,上游引物TF1 10μM和下游引物TR1 10μM各1.0μL,DNA模板1.5μL,ddH2O 16.5μL;PCR反应程序为:94℃ 3min;94℃ 30s,57℃ 30s,72℃ 1min,35个循环;72℃ 10min;取5.0μL PCR产物在1.5%m/v琼脂糖凝胶中电泳,经溴化乙锭染色后在紫外光下观测扩增产物大小,若能特异性地扩增出769bp的产物即判定所测样品为大豆灰斑病样品,所述的上游引物TF1,其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示,下游引物TR1,其核苷酸序列如序列表SEQID No.2所示。
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