[发明专利]高寒牧区青贮用的3株乳酸菌

说明书

技术领域

本发明属于畜牧业领域，具体涉及高寒牧区青贮用的3株乳酸菌。

背景技术

随着畜牧业的发展，乳酸菌制剂在青贮饲料中应用越来越广泛。大量研究表明，乳酸菌添加效果因代谢类型、原料特性和气候环境的不同而有所差异。冷凉地区饲草附着乳酸菌数量和组成不同于温带地区和热带地区。目前使用的商业乳酸菌主要来源于温带环境，同时有部分研究旨在筛选热带地区适应青贮调制的优势乳酸菌。

然而，针对川西北高寒牧区，乃至青藏高原高寒牧区极端环境下的饲草本身附着乳酸菌生理生化特性和应用基础等方面的研究极少。低温乳酸菌分为两种类型，即嗜冷乳酸菌

(Obligate LAB)和耐冷乳酸菌(Faculative LAB)。嗜冷乳酸菌可在0℃生长，优势生长温度≤15℃，最高生长温度20℃；耐冷乳酸菌也可在0℃生长，但最适生长温度≥20℃。筛选益生菌，抑制霉菌、酵母菌等好氧微生物产生霉菌孢子和真菌毒素，已是近年来青贮研究的热点。众所周知，致病有害微生物能够降低青贮饲料发酵品质，降低青贮饲料适口性和利用率，增加反刍动物寄生虫危害。青贮饲料中丁酸菌降低了饲用品质，而筛选能够抑制这类有害微生物生长的益生菌仍旧较少。相关研究报道指出，一些乳酸菌具有抗菌活性，能够影响有害微生物数量和组成，并且降低青贮饲料中真菌毒素含量。与此同时，在川西北高寒牧区，尤其是处于偏远、经济不发达、技术落后区域，因受设备滞后、资金紧张、技术欠缺、产能有限等客观条件制约，在青贮调制过程中推广使用机械设备来提高贮存温度改善青贮饲料品质的措施并不现实。因此，针对川西北高寒牧区低温气候特点，筛选低温乳酸菌，延长产酸(乳酸)时间，有助于提高青贮饲料品质。

发明内容

本发明所要解决的技术问题为：如何提供一种适合于高寒牧区青贮用的乳酸菌。

本发明的技术方案为：高寒牧区青贮用的3株乳酸菌，它们分别是保藏编号为CGMCC No.14117的植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)148，保藏编号为CGMCC No.14116的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)171，保藏编号为CGMCC No.14183的耐乙醇片球菌(Pediococcus ethanolidurans)P-14。

植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)148简称为菌株148，副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)171简称为菌株171，耐乙醇片球菌(Pediococcus ethanolidurans)P-14简称为菌株P-14。

上述3株乳酸菌在青贮上的应用。

菌株148和菌株171于2017年5月11日，菌株P-14于2017年5月24日保藏在中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明的菌株P-14、菌株148和菌株171的最适生长温度为15℃，具有生长速度快、产酸多等特征，为青贮调制提供有利条件。能够在低温条件下快速完成发酵(≤20d)，增加乳酸和总酸含量，降低pH值、氨态氮/总氮比值、丙酸和丁酸含量，改善青贮饲料发酵品质，提高青贮饲料粗蛋白含量和体外干物质消化率，可在青贮调制过程中作为添加剂使用。

附图说明

图1接种菌株绿汁液发酵48h后的pH值和菌体吸光度(OD₆₀₀)；

图2接种乳酸菌株后绿汁发酵液OD₆₀₀曲线；

图3接种乳酸菌株后绿汁发酵液pH曲线；

图4接种菌株绿汁液发酵48h后的乳酸、乙酸、丙酸和乙醇含量；

图5接种乳酸菌株后绿汁发酵液乳酸曲线；

图6温度对接种乳酸菌绿汁发酵液pH值的影响(48h)；

图7参考乳酸菌PCR扩增片段电泳图谱；

图8所筛选乳酸菌PCR扩增片段电泳图谱；

图9乳酸菌对青贮饲料pH值的影响；

图10乳酸菌对青贮饲料乳酸含量的影响；

图11低温乳酸菌对青贮饲料氨态氮/总氮比值的影响。

具体实施方式

1材料与方法

1.1乳酸菌的分离