[发明专利]一种脐带血造血干细胞的扩增方法在审
申请号: | 201711081337.X | 申请日: | 2017-11-03 |
公开(公告)号: | CN107630002A | 公开(公告)日: | 2018-01-26 |
发明(设计)人: | 嵐山芮;魏伟;袁嘉恩 | 申请(专利权)人: | 广州市天河诺亚生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N5/0789 | 分类号: | C12N5/0789 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司44202 | 代理人: | 宋静娜,郝传鑫 |
地址: | 510000 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脐带血 造血 干细胞 扩增 方法 | ||
1.一种细胞扩增培养基,其特征在于,所述细胞扩增培养基含有QS11。
2.根据权利要求1所述的细胞扩增培养基,其特征在于,所述细胞扩增培养基中,QS11的浓度为0.25~4μmol/L。
3.根据权利要求1所述的细胞扩增培养基,其特征在于,所述细胞扩增培养基中,QS11的浓度为1μmol/L。
4.根据权利要求1所述的细胞扩增培养基,其特征在于,所述细胞扩增培养基还含有细胞因子,所述细胞因子为IL-6、IL-3、TPO、SCF、FLT-3中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的细胞扩增培养基,其特征在于,所述细胞扩增培养基为含有QS11、IL-6、IL-3、TPO、SCF和FLT-3的Stemspan培养基。
6.根据权利要求4或5所述的细胞扩增培养基,其特征在于,所述IL-6在细胞扩增培养基中的浓度为20ng/mL;所述IL-3在细胞扩增培养基中的浓度为20ng/mL;所述TPO在细胞扩增培养基中的浓度为50ng/mL;所述SCF在细胞扩增培养基中的为50ng/mL;所述FLT-3在细胞扩增培养基中的浓度为20ng/mL。
7.一种人脐带血造血干细胞的扩增方法,其特征在于,所述方法以脐带血造血干细胞为标本细胞,采用权利1~6任一项所述的细胞扩增培养基进行扩增培养,得到造血干细胞。
8.根据权利要求7所述的造血干细胞的扩增方法,其特征在于,包括如下具体步骤:
(1)将QS11溶解于细胞保护剂中,得到QS11储存溶液;
(2)将步骤(1)得到的QS11储存溶液添加到含有细胞因子的基本培养基中,得细胞扩增培养基;
(3)将脐带血造血干细胞接种至步骤(2)得到的细胞扩增培养基中进行扩增培养,得到造血干细胞。
9.根据权利要求8所述的脐带血造血干细胞的扩增方法,其特征在于,所述步骤(3)为:
(a)采集的新鲜脐带血,通过Ficoll淋巴细胞分离液分离单个核细胞,经过离心后,收集白膜层,加生理盐水重悬再离心,然后加入细胞保护剂后程控降温,得到脐带血造血干细胞,随后将脐带血造血干细胞储存于液氮中;
(b)诱导分化前,先将脐带血造血干细胞解冻,加生理盐水重悬洗涤再离心,收集得到脐带血造血干细胞。
10.QS11或如权利1~6任一项所述细胞扩增培养基在以脐带血造血干细胞为标本细胞制备造血干细胞中的应用。
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