[发明专利]一种高活性杏鲍菇液体菌种及其发酵方法

权利要求书

1.一种高活性杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤（1）：将保存的杏鲍菇斜面菌种接种于平板培养基活化，培养并选择生长速度在5-6mm/d的菌丝为母种，接种母种菌块距菌落边缘2-3mm的菌丝于液体种子培养基，静置至菌丝块萌发，转至摇床恒温培养，得到液体种，然后再将液体种依次经摇瓶种子培养基和种子罐培养基逐级扩大培养得到种子罐种子；

步骤（2）：将发酵培养基装液量为15L，倒入30L的发酵罐中，与120℃下灭菌1-2h，灭菌后水喷淋冷却并通入无菌空气，将得到的种子罐种子以6-8%的接种量接种于发酵罐中，于35-38℃、通气量为2-4L/min条件下恒温发酵1-2天，然后缓慢降温至25-28℃，向发酵罐中继续接入700-800ml的种子罐种子，在通气量为5-7L/min条件下发酵18-20h，然后以0.03-0.05℃/min的速率降温至20-22℃，在通气量为3-5L/min条件下恒温发酵2-3天即可得到高活性杏鲍菇液体菌种高活性杏鲍菇液体菌种。

2.根据权利要求1所述的高活性杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特征在于：所述的液体种子培养基按重量百分比计包括以下组分：

土豆：10-16%，玉米粉：7-9%，白糖：2-5%，甘蔗渣：1-3%，葡萄糖：0.3-1%，中草药提取物：0.2-0.5%，琼脂：1-3%，磷酸二氢钾：0.3-0.6%，硫酸镁：0.1-0.3%，VB1:0.02-0.03%，硅油：0.1-0.3%，消泡剂：0.03-0.05%，余量为水，其中：

所述中草药提取物的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取黄芪19份，干姜17份，陈皮15份，牛黄20份，甘草20份，知母15份，金银花12份，鱼腥草17份，赤芍15份，川芎10份，当归4份；置盛有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于清洗12min，沥干，将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下，置容器中均匀混合并添加6-7倍重量的水，得混合物料，控制温度70-80℃保持3h，接着冷风吹送降温至35-45℃，用乳酸调节pH值为4，在功率200W条件下进行微波提取15min，同时在功率250W、频率35KHz条件下进行超声波辅助提取，然后加入混合物料总重量1.0％的混合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为6，酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇，控制温度至70℃保持3h，过滤，得第一滤液；添加滤渣2倍重量的水，控制温度90℃保持2h，然后降温至30℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比3:2合并，滤液真空浓缩后冷冻干燥、粉碎即得中草药提取物；

所述混合酶为葡聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比3:2:1均匀混合。

3.根据权利要求1所述的高活性杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特征在于：所述的摇瓶种子培养基和种子罐培养基相同，按质量份数计包括以下组分：小麦粒：50-60份，木屑：20-30份，油菜杆：7-9份，玉米芯：10-15份，麸皮：9-11份，白糖：1-3份，葡萄糖：1-2份，硫酸镁：0.1-0.3份，石灰：1-3份，磷酸二氢钾：0.3-0.5份；

该培养基的制备方法具体为：

（1）用清水对所用小麦漂洗干净，去除上浮的杂质及空瘪颗粒；

（2）在40℃-50℃温度下浸泡小麦粒或蒸煮小麦粒，使小麦粒吸水至中间无白芯为止；

（3）将白糖、葡萄糖、磷酸二氢钾及硫酸镁用水溶解，得到营养液，然后将吸水膨胀的小麦粒、木屑、油菜杆、玉米芯、麸皮、石灰及营养液混合搅拌均匀，调制到含水率60%-65%，得到培养基，将培养基装瓶或装袋、灭菌、冷却。

4.根据权利要求1所述的高活性杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特征在于：所述发酵培养基按质量份数计包括以下组分：红糖：3-5份，麦麸1-2份，玉米芯：2-4份，蛋白胨：0.3-0.5份，MgSO4：0.1-0.2份，VB：1-2份，CMC：0.2-0.4份。

5.如权利要求1-4任一权利要求所述的高活性杏鲍菇液体菌种的发酵方法制得的高活性杏鲍菇液体菌种。