[发明专利]伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株及其应用

说明书

本发明提供伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株及其应用，属于动物医学的疫苗领域。伪狂犬病病毒LA1206‑80株，保藏编号为：CGMCC No.14329。本发明还提供伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株在制备伪狂犬病疫苗中的应用、一种重组载体活疫苗。该重组载体是在所述弱毒株基因组中插入了外源保护性抗原基因表达盒后得到的。PRV LA1206‑80株的活疫苗对1日龄初生仔猪100%安全，可用于初生仔猪的早期免疫，尽早阻断野毒的感染。接种断奶PRV阴性仔猪后能快速产生高效保护力，尤其是该疫苗不但能阻止发病，还能阻止排毒。通过对PRV gE和gB抗体进行监测，非常有利于对PRV变异株的净化。

技术领域

本发明属于动物医学的疫苗领域，具体涉及伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株及其应用。

背景技术

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的一种急性、烈性传染病。牛、羊等家畜和野生动物发生伪狂犬病时常表现为奇痒的典型症状，以及发热和脑脊髓炎等临床症状。而猪发生伪狂犬病的症状与年龄相关，母猪常发生流产；新生仔猪有神经症状，死亡率高；育肥猪主要是呼吸道症状，成年猪感染伪狂犬病毒后生长停滞，通常不发生死亡。由于PRV基因缺失株疫苗(如gE基因缺失的Bartha K61株等)的发明和大规模推广使用，并配合鉴别免疫猪与野毒感染猪的PRV gE抗体的ELISA检测方法的建立和应用，通过持续淘汰阳性种猪，世界上许多国家实现了在家养猪群中伪狂犬病病毒的净化，在我国，许多猪场也成功建立了PRV gE抗体阴性的猪群，不少猪场基本实现了PRV的净化，猪伪狂犬病得到了较好控制。

自2011年以来，我国北方许多免疫过传统猪伪狂犬病疫苗的猪场大规模出现猪伪狂犬病疫情，之后疫情迅速向全国大部分养猪场蔓延，PRV gE抗体阳性率居高不下，对我国养猪业造成严重危害。多个团队的研究结果证明此轮疫情是由变异的PRV野毒株引起，该变异株的致病性显著增强，其主要抗原基因与传统疫苗株有明显不同，为更有效地应对PRV变异株的危害，应用变异株研制既能提高保护力，又能鉴别诊断免疫猪与野毒感染猪的新型疫苗是当前我国猪伪狂犬病防控的关键。但是，现有变异株活疫苗的安全性还不够高。例如，申请号为201510388390.9的发明专利中公开了通过敲除伪狂犬病病毒野毒AH02LA株gE基因后获得的LA-A株，采用该毒株制备的疫苗对伪狂犬病病毒变异株100％保护效果，尤其是该疫苗不但能阻止发病，还能阻止排毒，但是，该毒株仅对4周龄仔猪安全。

发明内容

本发明的目的是提供伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株，该毒株能够很好的适应ST细胞，滴度高，毒力显著降低，对1日龄仔猪无致病性，因此是具有较高安全性的疫苗候选弱毒株。

伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株，是伪狂犬病病毒LA1206-80株，保藏编号为：CGMCC No.14329。

本发明的另一目的是提供伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株在制备伪狂犬病疫苗中的应用，采用该疫苗免疫后能够对免疫猪只提供100％保护，不但能阻止发病，还能阻止排毒，由于该毒株毒力显著降低，对1日龄仔猪无致病性，因此可用于初生仔猪的早期免疫，尽早阻断野毒的感染，该活疫苗具有较高的安全性。

本发明的再一目的是提供以伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株为活性成分的疫苗。采用伪狂犬病病毒LA1206-80株的疫苗对1日龄初生仔猪安全，接种断奶PRV阴性易感仔猪后7天即能达到对伪狂犬病病毒变异株100％保护效果，尤其是该疫苗不但能阻止发病，还能阻止排毒，在安全性和免疫效力上都取得了意想不到的技术效果。通过对抗体进行监测，可以区分免疫该疫苗的动物与感染动物，有利于对PRV变异株的净化。