[发明专利]一种石斛多倍体植株的培育方法

权利要求书

1.一种石斛多倍体植株的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将消毒后的石斛种子抖入秋水仙素溶液中，黑暗条件下培养6～10d后，离心、洗涤去除秋水仙素；所述秋水仙素溶液浓度为0.1～0.4％，pH为5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液；

(2)将秋水仙素处理过的石斛种子转接到石斛种子萌发培养基中，先于培养箱中黑暗条件下培养5～8d，再移至培养室，培养温度23～28℃，光照度2000～2800lx，光照12h/d，培养三个月得到多倍体石斛幼苗；所述石斛种子萌发培养基组成如下：1-萘乙酸0.2～0.5mg/L，pH5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液；

(3)将上述培养得到的石斛幼苗，挑选出茎变粗、叶片加厚、叶色加深的植株，转接到石斛增殖培养基中进行稳定扩繁，选取2～3代性状稳定的植株进行多倍体的鉴定；所述石斛增殖培养基组成如下：6-苄氨基嘌呤1.0～2.0mg/L，1-萘乙酸0.1～0.5mg/L，pH5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液；

(4)鉴定为多倍体的植株转接到生根壮苗培养基中进行培养，即获得石斛多倍体植株的幼苗；所述生根壮苗培养基组成如下：1-萘乙酸0.5～0.6mg/L，香蕉汁5～10％，pH5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液。

2.根据权利要求1所述的石斛多倍体植株的培育方法，其特征在于，所述MS培养液包括：BA 0.8～1.2mg/L、KT 0.7～1.2mg/L、蔗糖30～40g/L、琼脂6～8g/L、葡萄汁10～22g/L。

3.根据权利要求1所述的石斛多倍体植株的培育方法，其特征在于，所述石斛种子的消毒方法是将石斛蒴果使用5～8％的双氧水溶液浸泡6～12min，清水冲洗，再用无菌水冲洗，0.1％升汞消毒5～10min，无菌吸水纸将蒴果表面残留的水分吸干即可。

4.根据权利要求1所述的石斛多倍体植株的培育方法，其特征在于，所述步骤(4)的培养条件为：温度25±2℃，湿度55～65％，光照强度1600～2000Lux，光照时间9～12h/d。